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(3.66MＢ)

[Ｆ−７　遺伝子組換え生物の開放系利用による遺伝子移行と生物多様性への影響評価に関する研究]

（１）遺伝子組換え微生物の微生物多様性への影響評価手法の開発に関する研究
　　 �◆＾篥岨卮�現応答の解析による迅速な微生物多様性の影響評価手法の開発

独立行政法人国立環境研究所

　

生物多様性研究プロジェクト分子生態影響評価研究チーム

岩崎一弘

 

[平成15〜17年度合計予算額]

　平成l5〜17年度合計予算額　30,719千円
　(うち、平成17年度予算額　9,582千円)
※上記の予算額には、間接経費　7,089千円を含む

［要旨］

　 近年のバイオテクノロジー技術の発展に伴い遺伝子組換え生物の利用用途、利用形態の多様化が進んでいる。このような背景の下、2000年1月に生物多様性条約に関連するカルタヘナ議定書が採択され、これまでの人に対する安全性評価に加え新たに生物多様性への悪影響を防止することを目的とした生態系影響評価が求められている。
　そこで本研究では、短期間で組換え微生物の評価が可能な生態系影響評価技術の開発を最終的な目標とし、まず組換え微生物接種に対する環境微生物数およびその遺伝子の応答を調べた。
　霞ヶ浦の湖心より採取した湖水試料を用いて模擬環境としてのマイクロコズムを作成した。菌体を接種しない系を対照とし、各系は三連用意した。マイクロコズムより経時的にサンプリングを行い、各種選択培地で組換え微生物、非組換え微生物および環境微生物のコロニー計数を行った。また、サンプリングした試料よりtotal DNAを抽出し、16S rDNAをターゲットとしてPCR法により増幅を行い、DGGE分析により解析した。平板法による細菌の計数結果においては、組換えおよび非組換え微生物の影響は認められなかった。一方PCR-DGGE分析による解析の結果、無接種の対照系と比べて組換えおよび非組換え微生物の接種による微生物多様性への影響は認められなかった。

［キーワード］

　微生物生態、遺伝子組換え、16S rRNA遺伝子、PCR法、DGGE分析