○作物残留に係る農薬登録保留基準を改正する件

〔平成一四・三・二二　環告二三〕

　農薬取締法第三条第二項の規定により定められた同条第一項第四号から第七号までに掲げる場合に該当するかどうかの基準を定める等の件第一号イの環境大臣の定める基準を定める件（昭和四十八年七月環境庁告示第四十六号）の一部を次のように改正し、平成十四年四月一日から適用する。

　１の表２、４―ビス（エチルアミノ）―６―メチルチオ―１、３、５―トリアジン（別名シメトリン）の項を削る。

　１の表Ｎ―（３、５―ジクロロフェニル）―１、２―ジメチルシクロプロパン―１、２―ジカルボキシミド（別名プロシミドン）の項を次のように改める。

　１の表（±）―５―アミノ―１―（２、６―ジクロロ―α、α、α―トリフルオロ―ｐ―トルイル）―４―トリフルオロメチルスルフィニルピラゾール―３―カルボニトリル（別名フィプロニル）の項を削る。

　１の表（ＲＳ）―α―シアノ―３―フェノキシベンジル　Ｎ―（２―クロロ―α、α、α―トリフルオロ―ｐ―トリル）―Ｄ―バリナート（別名フルバリネート）の項を削る。

　１の表エチル　２―クロロ―５―（４―クロロ―５―ジフルオロメトキシ―１―メチルピラゾール―３―イル）―４―フルオロフェノキシアセタート（別名ピラフルフェンエチル）の項を次のように改める。

　１の表（２Ｒ、３ａＳ、５ａＲ、５ｂＳ、９Ｓ、１３Ｓ、１４Ｒ、１６ａＳ、１６ｂＲ）―２―（６―デオキシ―２、３、４―トリ―Ｏ―メチル―α―Ｌ―マンノピラノシルオキシ）―１３―（４―ジメチルアミノ―２、３、４、６―テトラデオキシ―β―Ｄ―エリスロピラノシルオキシ）―９―エチル―２、３、３ａ、５ａ、５ｂ、６、７、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６ａ、１６ｂ―ヘキサデカヒドロ―１４―メチル―１Ｈ―８―オキサシクロドデカ［ｂ］ａｓ―インダセン―７、１５―ジオン（以下「スピノシンＡ」という。）及び（２Ｓ、３ａＲ、５ａＳ、５ｂＳ、９Ｓ、１３Ｓ、１４Ｒ、１６ａＳ、１６ｂＲ）―２―（６―デオキシ―２、３、４―トリ―Ｏ―メチル―α―Ｌ―マンノピラノシルオキシ）―１３―（４―ジメチルアミノ―２、３、４、６―テトラデオキシ―β―Ｄ―エリスロピラノシルオキシ）―９―エチル―２、３、３ａ、５ａ、５ｂ、６、７、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６ａ、１６ｂ―ヘキサデカヒドロ―４、１４―ジメチル―１Ｈ―８―オキサシクロドデカ［ｂ］ａｓ―インダセン―７、１５―ジオン（以下「スピノシンＤ」という。）の混合物（別名スピノサド）の項を次のように改める。

　１の表３―ドデシル―１、４―ジヒドロ―１、４―ジオキソ―２―ナフチル　アセタート（別名アセキノシル）の項を次のように改める。

　１の表（ＲＳ）―２―［２―（３―クロロフェニル）―２、３―エポキシプロピル］―２―エチルインダン―１、３―ジオン（別名インダノファン）の項を削る。

　１の表Ｎ―（２、３―ジクロロ―４―ヒドロキシフェニル）―１―メチルシクロヘキサンカルボキサミド（別名フェンヘキサミド）の項を次のように改める。

　１の表メチル　３―クロロ―５―（４、６―ジメトキシピリミジン―２―イルカルバモイルスルファモイル）―１―メチルピラゾール―４―カルボキシラート（別名ハロスルフロンメチル）の項を削る。

　１の表Ｎ―（４、６―ジメチルピリミジン―２―イル）アニリン（別名ピリメタニル）の項を次のように改める。

　２（８５）を次のように改める。

　（８５）　削除

　２（１０９）を次のように改める。

　（１０９）　プロシミドン試験法

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するプロシミドンの試験法による。

　２（２８３）を次のように改める。

　（２８３）　削除

　２（２８７）を次のように改める。

　（２８７）　削除

　２（３２５）を次のように改める。

　（３２５）　ピラフルフェンエチル試験法

第１　麦・穀類、果実及びナッツ類の場合

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するピラフルフェンエチルの試験法による。

第２　野菜の場合

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　ケイ酸マグネシウムミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＮＨ_２シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＳＣＸシリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＳＣＸシリカゲル（シリカゲルにスルホフェニルプロピル基を化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　多孔性ケイソウ土カラム　内径約２ｃｍのカラムに２０ｍｌ保持量のカラムクロマトグラフィー用顆粒状多孔性ケイソウ土を充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ピラフルフェンエチル標準品　本品は、ピラフルフェンエチル９９％以上を含み、融点は１２６〜１２８℃である。

ウ　試験溶液の調製

　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトニトリル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。

　この濃縮液を多孔性ケイソウ土カラムに流し入れ、１０分間放置する。これをヘキサン１００ｍｌで展開し、溶出液を３００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトン５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、ＳＣＸシリカゲルミニカラムにアセトン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、アセトン１０ｍｌで展開し、全溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（３：２）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル１ｍｌ及び蒸留水９ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、アセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、ＮＨ_２シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９７：３）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（１７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、４ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　ピラフルフェンエチルの０．１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　ピラフルフェンエチル標準品の０．０５〜１ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってピラフルフェンエチルの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりピラフルフェンエチルの重量を求め、これに基づき、検体中のピラフルフェンエチルの濃度を算出する。

　２（３２７）を次のように改める。

　（３２７）　スピノサド試験法

第１　果実（いちごを除く。）、野菜及び茶の場合

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するスピノサドの試験法による。

第２　いちごの場合

ア　装置　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　酢酸アンモニウム　酢酸アンモニウム（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　トリエチルアミン　トリエチルアミン（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＣＨシリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＣＨシリカゲル（シリカゲルにシクロヘキシル基を化学的に結合させたもの）１９００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　スピノシンＡ標準品　本品は、スピノシンＡ９０％以上を含み、融点は８４〜９９．５℃である。

　スピノシンＤ標準品　本品は、スピノシンＤ９０％以上を含み、融点は１６１．５〜１７０℃である。

ウ　試験溶液の調製

　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を２００ｍｌのメスシリンダーに合わせ、アセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）を加えて２００ｍｌとし、その１００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に取る。これに１０％塩化ナトリウム溶液１５０ｍｌを加え、次いで酢酸エチル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

　この残留物に蒸留水、アセトニトリル及びメタノールの混液（３：１：１）１０ｍｌを加えて溶かす。あらかじめ、ＣＨシリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、アセトニトリル１０ｍｌ、次いでアセトン１０ｍｌで展開し、これらの流出液を捨てる。次いでアセトニトリル及びトリエチルアミンの混液（４９：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン１０ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにアセトン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（４：１）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトン５ｍｌで展開し、この溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、２ｍｌとして、これをスピノシンＡ及びスピノシンＤの試験溶液とする。

エ　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　アセトニトリル、メタノール及び２％酢酸アンモニウムの混液（２：２：１）を用い、スピノシンＡ及びスピノシンＤがそれぞれ１０〜１５分で流出するように流速を調整する。

　検出器　波長２５０ｎｍで測定する。

　感度　スピノシンＡ及びスピノシンＤのそれぞれ２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　スピノシンＡ標準品及びスピノシンＤ標準品をそれぞれアセトニトリルに溶解し、各溶液を等量ずつ合わせ取る。これらをアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）で希釈し、スピノシンＡ及びスピノシンＤの０．１〜２ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれ２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってスピノシンＡ及びスピノシンＤの検量線を作成する。

カ　定量試験

　スピノシンＡ及びスピノシンＤの試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりスピノシンＡ及びスピノシンＤの各重量を求める。このスピノシンＡ及びスピノシンＤの重量の値を合計し、これに基づき、検体中のスピノサドの濃度を算出する。

　２（３２８）を次のように改める。

　（３２８）　アセキノシル試験法

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するアセキノシルの試験法による。

　２（３２９）を次のように改める。

　（３２９）　削除

　２（３３０）を次のように改める。

　（３３０）　フェンヘキサミド試験法

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するフェンヘキサミドの試験法による。

　２（３３１）を次のように改める。

　（３３１）　削除

　２（３３３）を次のように改める。

　（３３３）　ピリメタニル試験法

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するピリメタニルの試験法による。