○作物残留に係る農薬登録保留基準を改正する件

　　　〔平成一三・一二・二○　環告七九〕

　農薬取締法第三条第二項の規定により定められた同条第一項第四号から第七号までに掲げる場合に該当するかどうかの基準を定める等の件第一号イの環境大臣の定める基準を定める件（昭和四十八年七月環境庁告示第四十六号）の一部を次のように改正し、公布の日から適用する。

　１の表テトラクロルイソフタロニトリル（別名ＴＰＮ）の項を削る。

　１の表２―ｔｅｒｔ―ブチルイミノ―３―イソプロピル―５―フェニルペルヒドロ―１、３、５―チアジアジン―４―オン（別名ブプロフェジン）の項を次のように改める。

　１の表ブチル　（ＲＳ）―２―［４―（５―トリフルオロメチル―２―ピリジルオキシ）フェノキシ］プロピオナート（別名フルアジホップ）又はブチル　（Ｒ）―２―［４―（５―トリフルオロメチル―２―ピリジルオキシ）フェノキシ］プロピオナート（別名フルアジホップＰ）の項を次のように改める。

　１の表１―（６―クロロ―３―ピリジルメチル）―Ｎ―ニトロイミダゾリジン―２―イリデンアミン（別名イミダクロプリド）の項を次のように改める。

　１の表Ｎ―ｔｅｒｔ―ブチル―Ｎ′―（４―エチルベンゾイル）―３、５―ジメチルベンゾヒドラジド（別名テブフェノジド）の項を次のように改める。

　１の表４―（２、２―ジフルオロ―１、３―ベンゾジオキソール―４―イル）ピロール―３―カルボニトリル（別名フルジオキソニル）の項を次のように改める。

　１の表（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）―（１Ｒ、４Ｓ、５′Ｓ、６Ｓ、６′Ｒ、８Ｒ、１２Ｓ、１３Ｓ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）―６′―［（Ｓ）―ｓｅｃ―ブチル］―２１、２４―ジヒドロキシ―５′、１１、１３、２２―テトラメチル―２―オキソ―３、７、１９―トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ―１０、１４、１６、２２―テトラエン―６―スピロ―２′―（５′、６′―ジヒドロ―２′Ｈ―ピラン）―１２―イル　２、６―ジデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―Ｏ―（２、４、６―トリデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―メチルアミノ―α―Ｌ―リキソ―ヘキソピラノシル）―α―Ｌ―アラビノ―ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ_１ａ安息香酸塩」という。）及び（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）―（１Ｒ、４Ｓ、５′Ｓ、６Ｓ、６′Ｒ、８Ｒ、１２Ｓ、１３Ｓ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）―２１、２４―ジヒドロキシ―６′―イソプロピル―５′、１１、１３、２２―テトラメチル―２―オキソ―３、７、１９―トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ―１０、１４、１６、２２―テトラエン―６―スピロ―２′―（５′、６′―ジヒドロ―２′Ｈ―ピラン）―１２―イル　２、６―ジデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―Ｏ―（２、４、６―トリデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―メチルアミノ―α―Ｌ―リキソ―ヘキソピラノシル）―α―Ｌ―アラビノ―ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ_１ｂ安息香酸塩」という。）の混合物（別名エマメクチン安息香酸塩）の項を次のように改める。

　１の表メチル　（Ｅ）―２―［２―［６―（２―シアノフェノキシ）ピリミジン―４―イルオキシ］フェニル］―３―メトキシアクリラート（別名アゾキシストロビン）の項を次のように改める。

　１の表２′―ｔｅｒｔ―ブチル―５―メチル―２′―（３、５―キシロイル）クロマン―６―カルボヒドラジド（別名クロマフェノジド）の項を次のように改める。

　１の表３―アニリノ―５―メチル―５―（４―フェノキシフェニル）―１、３―オキサゾリジン―２、４―ジオン（別名ファモキサドン）の項を次のように改める。

　１の表１―（アリルオキシカルボニル）―１―メチルエチル　２―クロロ―５―［１、２、３、６―テトラヒドロ―３―メチル―２、６―ジオキソ―４―（トリフルオロメチル）ピリミジン―１―イル］ベンゾアート（別名ブタフェナシル）の項を次のように改める。

　１の表４―クロロ―２―シアノ―Ｎ、Ｎ―ジメチル―５―ｐ―トリルイミダゾール―１―スルホンアミド（別名シアゾファミド）の項を次のように改める。

　１の表メチル（ＲＳ）―７―クロロ―２、３、４ａ、５―テトラヒドロ―２―［メトキシカルボニル（４―トリフルオロメトキシフェニル）カルバモイル］インデノ［１、２―ｅ］［１、３、４］オキサジアジン―４ａ―カルボキシラート（別名インドキサカルブＭＰ）の項を次のように改める。

　１の表Ｎ―ｔｅｒｔ―ブチル―Ｎ′―（３―メトキシ―ｏ―トルオイル）―３、５―キシロヒドラジド（別名メトキシフェノジド）の項の次に次のように加える。

　２（１６）を次のように改める。

　（１６）　削除

　２（１３６）エ中「分離管　内径０．５〜０．６ｍｍ、長さ１０〜１５ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．５〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。」を「分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。」に改める。

　２（１７８）を次のように改める。

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するフルアジホップの試験法による。

　２（２８８）オ中「０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調整し、」を「０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、」に改める。

　２（２９４）を次のように改める。

　（２９４）　フルジオキソニル試験法

第１　果実及び野菜（第二葉菜類を除く。）の場合

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトン　アセトン（特級）

　塩化アンモニウム　塩化アンモニウム（特級）

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　リン酸　リン酸（特級）

　ケイ酸マグネシウムミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　凝固液　塩化アンモニウム２ｇにリン酸４ｍｌ及び蒸留水４００ｍｌを加えたもの

　フルジオキソニル標準品　本品は、フルジオキソニル９９．５％以上を含み、融点は１９９．４℃である。

ウ　試験溶液の調製

　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、アセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。

　この濃縮液を５％塩化ナトリウム溶液１００ｍｌ、次いで酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトン３０ｍｌを加えて溶かす。

　この溶液に凝固液５０ｍｌ及びケイソウ土２ｇを加えて緩やかに振り混ぜ、５分間放置した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。使用したナス型フラスコを凝固液及びアセトンの混液（５：３）５０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、吸引ろ過する。全ろ液を３００ｍｌの分液漏斗に合わせ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサンを加えて溶かし、１０ｍｌとする。

　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液の５ｍｌを分取して流し入れ、ヘキサン２０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（１７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、５ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　フルジオキソニルの０．０４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　フルジオキソニル標準品の０．０２〜０．４ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってフルジオキソニルの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりフルジオキソニルの重量を求め、これに基づき、検体中のフルジオキソニルの濃度を算出する。

第２　第二葉菜類の場合

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するフルジオキソニルの試験法による。

　２（３０９）オ２）中の「ウのＡ法の６）」を「ウのＡ法の７）」に改め、２（３０９）のイ及びウを次のように改める。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　イソプロパノール　イソプロパノール（特級）

　エタノール　エタノール（特級）

　酢酸アンモニウム　酢酸アンモニウム（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ジクロロジメチルシラン　ジクロロジメチルシラン（純度９９％以上のもの）

　ジクロロメタン　ジクロロメタン（特級）

　トルエン　トルエン（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　無水トリフルオロ酢酸　無水トリフルオロ酢酸（純度９９％以上のもの）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　１―メチルイミダゾール　１―メチルイミダゾール（特級）

　リン酸　リン酸（特級）

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　グラファイトカーボンミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用グラファイトカーボン５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＮＨ_２シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　スルホプロピルシリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用スルホプロピルシリカゲル（シリカゲルにスルホプロピル基を化学的に結合させたもの）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　シリル化処理目盛り付き試験管　蛍光誘導化反応に用いる。試験管に５％ジクロロジメチルシラントルエン溶液を満たし、密栓をして４０℃の水浴中に１０分間放置した後、試験管中の溶液を捨て、トルエン及びメタノールで十分に洗浄する。次いで試験管にメタノールを満たし、４０℃の水浴中に１０分間放置した後、試験管中のメタノールを捨て、十分に乾燥する。

　エマメクチン安息香酸塩標準品　本品は、エマメクチン安息香酸塩（エマメクチンＢ_１ａ安息香酸塩とエマメクチンＢ_１ｂ安息香酸塩の混合物）９２％以上を含み、融点は１４１〜１４６℃である。

　４″―エピ―アミノ―４″―デオキシ―アベルメクチンＢ_１（以下「アミノ体」という。）標準品　本品は、アミノ体９１％以上を含み、融点は１４６〜１４８℃である。

　４″―デオキシ―４″―エピ―（Ｎ―ホルミル）アミノ―アベルメクチンＢ_１（以下「ホルミルアミノ体」という。）標準品　本品は、ホルミルアミノ体８２％以上を含み、融点は１７７〜１８０℃である。

　４″―デオキシ―４″―エピ―（Ｎ―ホルミル―Ｎ―メチル）アミノ―アベルメクチンＢ_１（以下「Ｎ―メチルホルミルアミノ体」という。）標準品　本品は、Ｎ―メチル　ホルミルアミノ体８５％以上を含み、融点は１６３〜１６９℃である。

ウ　試験溶液の調製

Ａ法（麦・雑穀、果実（いちごを除く。）及びいも類の場合）

１）　試料１０ｇ（果実（いちごを除く。）の場合は細切した検体１０ｇ）を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、メタノール２５ｍｌを加え、３分間細砕した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してメタノール２５ｍｌを加え、同様の細砕及びろ過の操作を繰り返す。メタノール２５ｍｌ及び蒸留水４０ｍｌでろ紙上の残留物を洗い、同様にろ過する。全ろ液を５００ｍｌの三角フラスコに合わせ、蒸留水を加え５００ｍｌとする。

２）　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール１０ｍｌ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これに三角フラスコ中の溶液を毎分約１０ｍｌの流速で流し入れ、流出液を捨てる。次いで１％酢酸アンモニウムメタノール溶液１０ｍｌで展開し、溶出液を１５ｍｌの試験管に取り、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で約１ｍｌに濃縮する。

　これに、１％酢酸アンモニウム溶液４ｍｌ及び酢酸エチル５ｍｌを加えて密栓し、１分間振り混ぜた後、毎分２０００回転で４分間遠心分離し、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５ｍｌを加え、同様の振とう、遠心分離及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を１５ｍｌの試験管に合わせる。

　あらかじめ、スルホプロピルシリカゲルミニカラムに１％酢酸アンモニウムメタノール溶液、１％リン酸メタノール溶液、蒸留水、メタノール及び酢酸エチルの順にそれぞれ５ｍｌずつ流し入れ、洗浄しておく。これに試験管中の溶液を毎分５ｍｌ以下の流速で流し入れ、次いで酢酸エチル２ｍｌで試験管を洗い、その洗液を同様に流し入れ、全溶出液を１５ｍｌの試験管に取り、これをホルミルアミノ体及びＮ―メチルホルミルアミノ体溶出液とする。次いで、１％酢酸アンモニウムメタノール溶液１０ｍｌで展開し、溶出液を１５ｍｌの試験管に取り、１％酢酸アンモニウムメタノール溶液を加え１０ｍｌとし、これをエマメクチン安息香酸塩及びアミノ体溶出液とする。

３）　エマメクチン安息香酸塩及びアミノ体溶出液をよく混合し、その２ｍｌを１５ｍｌの試験管に取り、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で約１ｍｌに濃縮する。これに蒸留水４ｍｌ及び酢酸エチル５ｍｌを加えて密栓し、１分間振り混ぜた後、毎分２０００回転で４分間遠心分離し、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５ｍｌを加え、同様の振とう、遠心分離及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を綿栓をした漏斗を用いてろ過し、ろ過器上を酢酸エチル２ｍｌで洗浄する。全ろ液を１０ｍｌのシリル化処理目盛り付き試験管に合わせ、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で約０．５ｍｌに濃縮する。これにアセトニトリル２ｍｌを加えて密栓し、軽く振り混ぜた後１０分間氷冷する。

４）　これに１―メチルイミダゾール０．１ｍｌを加えて密栓し、軽く振り混ぜた後１０分間氷冷する。これに、あらかじめ氷冷したアセトニトリル及び無水トリフルオロ酢酸の混液（２：１、用時調製）０．３ｍｌを加えて密栓し、よく混合した後２０℃の水浴中で１０分間放置する。これにアセトニトリルを加え、５ｍｌとしてエマメクチン安息香酸塩及びアミノ体の試験溶液とする。

５）　ホルミルアミノ体及びＮ―メチルホルミルアミノ体溶出液を、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で溶媒を除去する。

６）　この残留物にジクロロメタン２ｍｌを加えて溶かし、ヘキサン８ｍｌを加えてよく混合する。これを、あらかじめメタノール１０ｍｌ、ジクロロメタン１０ｍｌ、次いでヘキサン１０ｍｌを流し入れ洗浄したＮＨ_２シリカゲルミニカラムに毎分５ｍｌ以下の流速で流し入れる。試験管をトルエン５ｍｌで２回、ヘキサン及びイソプロパノールの混液（１７：３）５ｍｌで２回洗浄し、その洗液を順次カラムに流し入れ、流出液を捨てる。次いで酢酸エチル及びエタノールの混液（１７：３）１０ｍｌで展開し、溶出液を１５ｍｌの試験管に取り、酢酸エチル及びエタノールの混液（１７：３）を加え１０ｍｌとする。これをよく混合した後、その２ｍｌを１０ｍｌのシリル化処理目盛り付き試験管に取り、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で溶媒を除去する。この残留物にアセトニトリル１ｍｌを加えて溶かした後密栓し、１０分間氷冷する。

７）　これに１―メチルイミダゾール０．１ｍｌを加えて密栓し、軽く振り混ぜた後１０分間氷冷する。これに、あらかじめ氷冷したアセトニトリル及び無水トリフルオロ酢酸の混液（２：１、用時調製）０．３ｍｌを加えて密栓し、よく混合した後２０℃の水浴中で１０分間放置する。これにメタノール及び蒸留水の混液（４：１）を加え、５ｍｌとしてホルミルアミノ体及びＮ―メチルホルミルアミノ体の試験溶液とする。

Ｂ法（いちごの場合）

　細切した検体１０ｇを１００ｍｌの三角フラスコに量り取り、メタノール２５ｍｌを加え、３分間細砕した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してメタノール２５ｍｌを加え、同様の細砕及びろ過の操作を繰り返す。メタノール２５ｍｌ及び蒸留水４０ｍｌでろ紙上の残留物を洗い、同様にろ過する。全ろ液に蒸留水を加えて２００ｍｌとする。この４０ｍｌを３００ｍｌの分液漏斗に取り、蒸留水４０ｍｌ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で約１ｍｌに濃縮し、酢酸エチルを加えて１０ｍｌとする。

　あらかじめ、スルホプロピルシリカゲルミニカラムに１％酢酸アンモニウムメタノール溶液、１％リン酸メタノール溶液、蒸留水、メタノール及び酢酸エチルの順に各々５ｍｌずつ流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を毎分５ｍｌ以下の流速で流し入れ、酢酸エチル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、これをホルミルアミノ体及びＮ―メチルホルミルアミノ体溶出液とする。次いで、１％酢酸アンモニウムメタノール溶液１０ｍｌで展開し、溶出液を１５ｍｌの試験管に取り、これをエマメクチン安息香酸塩及びアミノ体溶出液とする。

　エマメクチン安息香酸塩及びアミノ体溶出液を５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で約１ｍｌに濃縮する。これに蒸留水４ｍｌ及び酢酸エチル５ｍｌを加えて密栓し、１分間振り混ぜた後、毎分２０００回転で４分間遠心分離し、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５ｍｌを加え、同様の振とう、遠心分離及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を綿栓をした漏斗を用いてろ過し、ろ過器上を酢酸エチル２ｍｌで洗浄する。全ろ液を１０ｍｌのシリル化処理目盛り付き試験管に合わせ、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で約０．５ｍｌに濃縮する。これにアセトニトリル２ｍｌを加えて密栓し、軽く振り混ぜた後１０分間氷冷する。以下、この溶液についてＡ法の４）と同様の操作を行う。

　ホルミルアミノ体及びＮ―メチルホルミルアミノ体溶出液を、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にジクロロメタン２ｍｌを加えて溶かし、ヘキサン８ｍｌを加えてよく混合する。これを、あらかじめメタノール１０ｍｌ、ジクロロメタン１０ｍｌ、次いでヘキサン１０ｍｌを流し入れ洗浄したＮＨ_２シリカゲルミニカラムに毎分５ｍｌ以下の流速で流し入れる。ナス型フラスコをトルエン５ｍｌで２回、ヘキサン及びイソプロパノールの混液（１７：３）５ｍｌで２回洗浄し、その洗液を順次カラムに流し入れ、流出液を捨てる。次いで酢酸エチル及びエタノールの混液（１７：３）１０ｍｌで展開し、溶出液を１５ｍｌのシリル化処理目盛り付き試験管に取り、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で溶媒を除去する。この残留物にアセトニトリル１ｍｌを加えて溶かした後密栓し、氷冷する。以下、この溶液についてＡ法の７）と同様の操作を行う。

Ｃ法（野菜の場合）

　Ａ法の１）、２）、３）、４）及び５）と同様の操作を行う。この残留物にアセトニトリル及びトルエンの混液（３：１）５ｍｌを加えて溶かす。あらかじめ、グラファイトカーボンミニカラムにアセトニトリル及びトルエンの混液（３：１）５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これに試験管中の溶液を毎分５ｍｌ以下の流速で流し入れ、アセトニトリル及びトルエンの混液（３：１）１０ｍｌで展開し、全溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに合わせる。すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で約０．５ｍｌに濃縮し、窒素ガス気流中で溶媒を除去する。以下、この残留物について、Ａ法の６）及び７）と同様の操作を行う。

　２（３１５）を次のように改める。

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するアゾキシストロビンの試験法による。

　２（３３４）のウを次のように改める。

ウ　試験溶液の調製

Ａ法（米、果実、野菜及びてんさいの場合）

１）　検体２０ｇ相当の試料（米の場合は試料１０ｇに水２０ｍｌを加えて２時間放置したもの）を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトニトリル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて、吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。

２）　この濃縮液を５％塩化ナトリウム溶液１００ｍｌ、次いで酢酸エチル５０ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

３）　この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（１７：３）２０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。

４）　あらかじめ、アルミナミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（１９：１）２０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

５）　この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（３：２）を加えて溶かし、４ｍｌ（米の場合は２ｍｌ）として試験溶液とする。

Ｂ法（大豆の場合）

　試料１０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトニトリル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。以下、この溶液についてＡ法の２）と同様の操作を行う。

　この残留物をへキサン３０ｍｌ、次いでヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌで１００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、アセトニトリル層を分取する。残ったヘキサン層についても、ヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全アセトニトリル層を２００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法の３）及び４）と同様の操作を行う。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（３：２）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

Ｃ法（茶の場合）

　試料５ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトニトリル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。

　あらかじめ、ポリスチレンミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びアセトニトリルの混液（４：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取る。

　あらかじめ、グラファイトカーボンミニカラムにアセトニトリル５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、アセトニトリル５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びアセトニトリルの混液（４：１）５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめＣ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで、アセトニトリル及び蒸留水の混液（３：２）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。以下、この溶液についてＡ法の４）及び５）と同様の操作を行う。

　２（３３５）のウを次のように改める。

ウ　試験溶液の調製

Ａ法（果実、野菜及びいも類の場合）

１）　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。

２）　この濃縮液を多孔性ケイソウ土カラムに流し入れ、１０分間放置する。ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）１２０ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

３）　この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（３：２）５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、アルミナミニカラムにアセトン５ｍｌ、次いでヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（３：２）１５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びジエチルエーテルの混液（１７：３）５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びジエチルエーテルの混液（１７：３）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びジエチルエーテルの混液（７：３）１５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

４）　この残留物に蒸留水及びメタノールの混液（１：１）５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びメタノールの混液（１：１）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでメタノール及び蒸留水の混液（７：３）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

　この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、４ｍｌとして試験溶液とする。

Ｂ法（大豆の場合）

　試料１０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。以下、この溶液についてＡ法の２）と同様の操作を行う。

　この残留物をへキサン３０ｍｌ、次いでヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌで１００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、アセトニトリル層を分取する。残ったヘキサン層についても、ヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全アセトニトリル層を２００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法の３）と同様の操作を行う。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

　２（３５４）ウ中「あらかじめＮＨ_２シリカゲルミニカラムに」を「あらかじめ、ＮＨ_２シリカゲルミニカ　ラムに」に改める。

　２（３５８）ウＢ法中「蒸留水及びメタノールの混液（４：１）１５ｍｌ次いで蒸留水及びメタノールの混液（１：１）１５ｍｌで展開し、」を「蒸留水及びメタノールの混液（４：１）１５ｍｌ、次いで蒸留水及びメタノールの混液（１：１）１５ｍｌで展開し、」に改める。

　２（３５８）の次に次のように加える。

（３５９）　フェンピロキシメート試験法

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するフェンピロキシメートの試験法による。

（３６０）　フルアクリピリム試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトン　アセトン（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ジエチルエーテル　ジエチルエーテル（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　ケイ酸マグネシウムミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ケイ酸マグネシウム９１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＮＨ_２シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　多孔性ケイソウ土カラム　内径約２ｃｍのカラムに２０ｍｌ保持量のカラムクロマトグラフィー用顆粒状多孔性ケイソウ土を充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　フルアクリピリム標準品　本品は、フルアクリピリム９８％以上を含み、融点は１０７．２〜１０８．６℃である。

ウ　試験溶液の調製

　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。

　この溶液を多孔性ケイソウ土カラムに流し入れ、１０分間放置する。ヘキサン１００ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、ＮＨ_２シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これ　にナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びジエチルエーテルの混液（９：１）３０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（４：１）３０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

　この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　フルアクリピリムの０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　フルアクリピリム標準品の０．１〜２ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってフルアクリピリムの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりフルアクリピリムの重量を求め、これに基づき、検体中のフルアクリピリムの濃度を算出する。