○作物残留に係る農薬登録保留基準を改正する件

［平成一二・八・一七　環告五三］

　１の表１―（２―シアノ―２―メトキシイミノアセチル）―３―エチル尿素（別名シモキサニル）の項を次のように改める。

１―（２―シアノ―２―メトキシイミノアセチル）―３―エチル尿素（別名シモキサニル）	第一大粒果実類	０．１ｐｐｍ
	小粒果実類	０．２ｐｐｍ
	第二果菜類	０．５ｐｐｍ
	第一葉菜類	０．１ｐｐｍ
	いも類	０．１ｐｐｍ

　１の表（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）―（１Ｒ、４Ｓ、５′Ｓ、６Ｓ、６′Ｒ、８Ｒ、１２Ｓ、１３Ｓ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）―６′―［（Ｓ）―ｓｅｃ―ブチル］―２１、２４―ジヒドロキシ―５′、１１、１３、２２―テトラメチル―２―オキソ―３、７、１９―トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ―１０、１４、１６、２２―テトラエン―６―スピロ―２′―（５′、６′―ジヒドロ―２′Ｈ―ピラン）―１２―イル　２、６―ジデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―Ｏ―（２、４、６―トリデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―メチルアミノ―α―Ｌ―ｌｙｘｏ―ヘキソピラノシル）―α―Ｌ―ａｒａｂｉｎｏ―ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ_１ａ安息香酸塩」という。）及び（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）―（１Ｒ、４Ｓ、５′Ｓ、６Ｓ、６′Ｒ、８Ｒ、１２Ｓ、１３Ｓ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）―２１、２４―ジヒドロキシ―６′―イソプロピル―５′、１１、１３、２２―テトラメチル―２―オキソ―３、７、１９―トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ―１０、１４、１６、２２―テトラエン―６―スピロ―２′―（５′、６′―ジヒドロ―２′Ｈ―ピラン）―１２―イル　２、６―ジデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―Ｏ―（２、４、６―トリデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―メチルアミノ―α―Ｌ―ｌｙｘｏ―ヘキソピラノシル）―α―Ｌ―ａｒａｂｉｎｏ―ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ_１ｂ安息香酸塩」という。）の混合物（別名エマメクチン安息香酸塩）の項を次のように改める。

（１０Ｅ，１４Ｅ，１６Ｅ，２２Ｚ）―（１Ｒ，４Ｓ，５′Ｓ，６Ｓ，６′Ｒ，８Ｒ，１２Ｓ，１３Ｓ，２０Ｒ，２１Ｒ，２４Ｓ）―６′―［（Ｓ）―ｓｅｃ―ブチル］―２１，２４―ジヒドロキシ―５′，１１，１３，２２―テトラメチル―２―オキソ―３，７，１９―トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１４，８．０２０，２４］ペンタコサ―１０，１４，１６，２２―テトラエン―６―スピロ―２′―（５′，６′―ジヒドロ―２′Ｈ―ピラン）―１２―イル　２，６―ジデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―Ｏ―（２，４，６―トリデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―メチルアミノ―α―Ｌ―リキソ―ヘキソピラノシル）―α―Ｌ―アラビノ―ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ１ａ安息香酸塩」という。）及び（１０Ｅ，１４Ｅ，１６Ｅ，２２Ｚ）―（１Ｒ，４Ｓ，５′Ｓ，６Ｓ，６′Ｒ，８Ｒ，１２Ｓ，１３Ｓ，２０Ｒ，２１Ｒ，２４Ｓ）―２１，２４―ジヒドロキシ―６′―イソプロピル―５′，１１，１３，２２―テトラメチル―２―オキソ―３，７，１９―トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１４，８．０２０，２４］ペンタコサ―１０，１４，１６，２２―テトラエン―６―スピロ―２′―（５′，６′―ジヒドロ―２′Ｈ―ピラン）―１２―イル　２，６―ジデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―Ｏ―（２，４，６―トリデオキシ―３―Ｏ―メチル―４―メチルアミノ―α―Ｌ―リキソ―ヘキソピラノシル）―α―Ｌ―アラビノ―ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ１ｂ安息香酸塩」という。）の混合物（別名エマメクチン安息香酸塩）	第一大粒果実類	０．１ｐｐｍ
	小粒果実類	０．１ｐｐｍ
	第一果菜類	０．２ｐｐｍ
	第二果菜類	０．１ｐｐｍ
	第二葉菜類	０．１ｐｐｍ
	根・茎類	０．１ｐｐｍ

　１の表（ＲＳ）―１―［２、５―ジクロロ―４―（１、１、２、３、３、３―ヘキサフルオロプロポキシ）―フェニル］―３―（２、６―ジフルオロベンゾイル）尿素（別名ルフェヌロン）の項を次のように改める。

（ＲＳ）―１―［２，５―ジクロロ―４―（１，１，２，３，３，３―ヘキサフルオロプロポキシ）―フェニル］―３―（２，６―ジフルオロベンゾイル）尿素（別名ルフェヌロン）	りんご	１ｐｐｍ
	いちご	１ｐｐｍ
	第一果菜類	１ｐｐｍ
	トマト	０．５ｐｐｍ
	なす	０．５ｐｐｍ
	第一葉菜類	１ｐｐｍ
	だいこん類の葉	３ｐｐｍ
	ねぎ	３ｐｐｍ
	根・茎類	０．０５ｐｐｍ
	いも類	０．０５ｐｐｍ
	てんさい	０．２ｐｐｍ
	茶	１０ｐｐｍ

　１の表エチル　２―クロロ―５―（４―クロロ―５―ジフルオロメトキシ―１―メチルピラゾール―３―イル）―４―フルオロフェノキシアセタート（別名ピラフルフェンエチル）の項を次のように改める。

エチル　２―クロロ―５―（４―クロロ―５―ジフルオロメトキシ―１―メチルピラゾール―３―イル）―４―フルオロフェノキシアセタート（別名ピラフルフェンエチル）	米	０．１ｐｐｍ
	小麦	０．１ｐｐｍ
	小麦以外の麦・雑穀	０．１ｐｐｍ
	みかん	０．１ｐｐｍ
	みかん以外のかんきつ類	０．１ｐｐｍ
	第一大粒果実類	０．１ｐｐｍ
	第二大粒果実類	０．１ｐｐｍ
	小粒果実類	０．１ｐｐｍ
	ナッツ類	０．１ｐｐｍ

　１の表Ｎ―（２、３―ジクロロ―４―ヒドロキシフェニル）―１―メチルシクロヘキサンカルボキサミド（別名フェンヘキサミド）の項を次のように改める。

Ｎ―（２，３―ジクロロ―４―ヒドロキシフェニル）―１―メチルシクロヘキサンカルボキサミド（別名フェンヘキサミド）	みかん	０．５ｐｐｍ
	みかん以外のかんきつ類	５ｐｐｍ
	第一大粒果実類	１ｐｐｍ
	小粒果実類	２０ｐｐｍ
	第二果菜類	２ｐｐｍ
	鱗茎類	０．１ｐｐｍ

　１の表Ｎ―（７―フルオロ―３、４―ジヒドロ―３―オキソ―４―プロプ―２―イニル―２Ｈ―１、４―ベンゾキサジン―６―イル）シクロヘキサ―１―エン―１、２―ジカルボキシミド（別名フルミオキサジン）の項の次に次のように加える。

イソプロピル　２―（４―メトキシビフェニル―３―イル）ヒドラジノホルマート（別名ビフェナゼート）	みかん	０．２ｐｐｍ
	みかん以外のかんきつ類	１ｐｐｍ
	第一大粒果実類	０．２ｐｐｍ
	第二大粒果実類	２ｐｐｍ
	小粒果実類	３ｐｐｍ
	茶	２ｐｐｍ
３―［１―（３，５―ジクロロフェニル）―１―メチルエチル］―３，４―ジヒドロ―６―メチル―５―フェニル―２Ｈ―１，３―オキサジン―４―オン（別名オキサジクロメホン）	米	０．１ｐｐｍ

　２（３０９）イ中
「無水トリフルオロ酢酸　無水トリフルオロ酢酸（純度９９％以上のもの）」を
「無水トリフルオロ酢酸　無水トリフルオロ酢酸（純度９９％以上のもの） 　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）」
に改め、２（３０９）ウＡ法中「果実」の次に「（いちごを除く。）」を加え、２（３０９）ウＢ法を次のように改める。

Ｂ法（いちごの場合）
　細切した検体１０ｇを１００ｍｌの三角フラスコに量り取り、メタノール２５ｍｌを加え、３分間細砕した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してメタノール２５ｍｌを加え、同様の細砕及びろ過の操作を繰り返す。メタノール２５ｍｌ及び蒸留水４０ｍｌでろ紙上の残留物を洗い、同様にろ過する。全ろ液に蒸留水を加えて２００ｍｌとする。この４０ｍｌを３００ｍｌの分液漏斗に取り、蒸留水４０ｍｌ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で約１ｍｌに濃縮し、酢酸エチルを加えて１０ｍｌとする。
　あらかじめ、スルホプロピルシリカゲルミニカラムに１％酢酸アンモニウムメタノール溶液、１％リン酸メタノール溶液、蒸留水、メタノール及び酢酸エチルの順に各々５ｍｌずつ流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を毎分５ｍｌ以下の流速で流し入れ、酢酸エチル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、これをホルミルアミノ体及びＮ―メチルホルミルアミノ体溶出液とする。次いで、１％酢酸アンモニウムメタノール溶液１０ｍｌで展開し、溶出液を１５ｍｌの試験管に取り、これをエマメクチン安息香酸塩及びアミノ体溶出液とする。
　エマメクチン安息香酸塩及びアミノ体溶出液を５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で約１ｍｌに濃縮する。これに蒸留水４ｍｌ及び酢酸エチル５ｍｌを加えて密栓し、１分間振り混ぜた後、毎分２０００回転で４分間遠心分離し、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５ｍｌを加え、同様の振とう、遠心分離及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を綿栓をした漏斗を用いてろ過し、ろ過器上を酢酸エチル２ｍｌで洗浄する。全ろ液を１０ｍｌのシリル化処理目盛り付き試験管に合わせ、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で約０．５ｍｌに濃縮する。これにアセトニトリル２ｍｌを加えて密栓し、軽く振り混ぜた後１０分間氷冷する。以下、この溶液についてＡ法の４）と同様の操作を行う。
　ホルミルアミノ体及びＮ―メチルホルミルアミノ体溶出液を、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にジクロロメタン２ｍｌを加えて溶かし、ヘキサン８ｍｌを加えてよく混合する。これを、あらかじめメタノール１０ｍｌ、ジクロロメタン１０ｍｌ、次いでヘキサン１０ｍｌを流し入れ洗浄したＮＨ_２シリカゲルミニカラムに毎分５ｍｌ以下の流速で流し入れる。ナス型フラスコをトルエン５ｍｌで２回、ヘキサン及びイソプロパノールの混液（１７：３）５ｍｌで２回洗浄し、その洗液を順次カラムに流し入れ、流出液を捨てる。次いで酢酸エチル及びエタノールの混液（１７：３）１０ｍｌで展開し、溶出液を１５ｍｌのシリル化処理目盛り付き試験管に取り、５０〜７０℃に加温しながら窒素ガス気流中で溶媒を除去する。この残留物にアセトニトリル１ｍｌを加えて溶かした後密栓し、氷冷する。以下、この溶液についてＡ法の６）と同様の操作を行う。

　２（３３０）イ中「ピリジン　ピリジン（特級）」を削る。

　２（３４１）の次に次のように加える。

（３４２）　ビフェナゼート試験法
ア　装置　けい光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アスコルビン酸　Ｌ（＋）―アスコルビン酸（特級）

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　１，２―ジフェニルカルボノヒドラジド（以下「ＤＰＨ」という。）　ＤＰＨ（特級）

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　グラファイトカーボンミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用グラファイトカーボン５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　０．１％ＤＰＨアセトニトリル溶液　ＤＰＨ１ｇをアセトニトリルに溶かして１Ｌにしたもの。使用時に調製する。

　０．０１％ＤＰＨアセトニトリル溶液　ＤＰＨ０．１ｇをアセトニトリルに溶かして１Ｌにしたもの。使用時に調製する。

　２％アスコルビン酸溶液　アスコルビン酸２０ｇを蒸留水に溶かして１Ｌにしたもの。使用時に調製する。

　０．０２％アスコルビン酸溶液　アスコルビン酸０．２ｇを蒸留水に溶かして１Ｌにしたもの。使用時に調製する。

　ビフェナゼート標準品　本品は、ビフェナゼート９９％以上を含み、融点は１２３〜１２５℃である。

ウ　試験溶液の調製
　検体１０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトニトリル及び水の混液（３：２）１００ｍｌを加え（茶の場合は試料５ｇに水２０ｍｌを加え、２時間放置した後、アセトニトリル１００ｍｌを加える。）、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル及び水の混液（３：２）５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのメスシリンダーに合わせ、水を加えて５００ｍｌとし、その２５０ｍｌ（みかん以外のかんきつ類及び小粒果実類の場合は１２５ｍｌ、茶の場合は１００ｍｌ）を三角フラスコに取る。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これに三角フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びアセトニトリルの混液（７：３）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトニトリル及び２％アスコルビン酸溶液の混液（３：２）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取る。
　ナス型フラスコに栓をして時々振り混ぜながら５０℃で３０分間放置する。冷後、０．１％ＤＰＨアセトニトリル溶液０．５ｍｌを加える。
　あらかじめ、グラファイトカーボンミニカラムに０．０１％ＤＰＨアセトニトリル溶液１０ｍｌ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、０．０１％ＤＰＨアセトニトリル溶液及び蒸留水の混液（３：２）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで０．０１％ＤＰＨアセトニトリル溶液２５ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトニトリル及び０．０２％アスコルビン酸溶液の混液（３：２）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

エ　高速液体クロマトグラフの操作条件
　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　アセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を用い、ビフェナゼートが１５〜２０分で流出するように流速を調整する。

　検出器　励起波長２６６ｎｍ、けい光波長４２７ｎｍで測定する。

　感度　ビフェナゼートの２．５ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成
　ビフェナゼート標準品の５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、この溶液を０．０１％ＤＰＨアセトニトリル溶液及び蒸留水の混液（３：２）で希釈して、ビフェナゼート０．０５〜１ｍｇ／ｌ溶液を数点調製し、それぞれを５０μlずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってビフェナゼートの検量線を作成する。

カ　定量試験
　試験溶液から５０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりビフェナゼートの重量を求め、これに基づき、検体中のビフェナゼートの濃度を算出する。

　（３４３）　オキサジクロメホン試験法
ア　装置　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　ケイ酸マグネシウムミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　オキサジクロメホン標準品　本品は、オキサジクロメホン９８．２％以上を含み、融点は１４７〜１４９℃である。

ウ　試験溶液の調製
　試料１０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液を５％塩化ナトリウム溶液１００ｍｌ及びヘキサン５０ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、ヘキサン層を分取する。残った水層についても、ヘキサン５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全ヘキサン層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをヘキサン２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル２ｍｌ及び蒸留水３ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで、アセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）１５ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトニトリルを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

エ　高速液体クロマトグラフの操作条件
　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　アセトニトリル及び蒸留水の混液（３：１）を用い、オキサジクロメホンが１０〜１５分で流出するように流速を調整する。

　検出器　波長２３０ｎｍで測定する。

　感度　オキサジクロメホンの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成
　オキサジクロメホンの０．０５〜１ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってオキサジクロメホンの検量線を作成する。

カ　定量試験
　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりオキサジクロメホンの重量を求め、これに基づき、試料中のオキサジクロメホンの濃度を算出する。