〔平成一六・一二・二○ 環告七九〕
平成五年四月環境庁告示第三十五号（農薬取締法第三条第二項の規定により定められた同条第一項第四号から第七号までに掲げる場合に該当するかどうかの基準を定める等の件第四号の環境大臣の定める基準を定める件）の一部を次のように改正し、公布の日から適用する。
１の表Ｓ―１―メチル―１―フェニルエチル ピペリジン―１―カルボチオアート（別名ジメピペレート）の項を削る。
１の表３、５―ジメチルフェニル Ｎ―メチルカルバマート（別名ＸＭＣ）の項の次に次のように加える。
| ５―アミノ―１―（２，６―ジクロロ―α，α，α―トリフルオロ―p―トリル）―４―エチルスルフィニルピラゾール―３―カルボニトリル（別名エチプロール） | ０．１ｍｇ／Ｌ |
２(１２６)を次のように改める。
（１２６） 削除
２(１３８)の次に次のように加える。
（１３９） エチプロール試験法
ア 装置 紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。
イ 試薬試液
アセトニトリル アセトニトリル（特級）
塩化ナトリウム 塩化ナトリウム（特級）
酢酸 酢酸（特級）
酢酸エチル 酢酸エチル（特級）
ヘキサン ヘキサン（特級）
液相分離ろ紙 液相分離ろ紙（化学分析用ろ紙をシリコン処理したもの）
固相抽出カラム 内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
エチプロール標準品 本品は、エチプロール９９％以上を含み、分解点は１６４．５℃である。
ウ 試験溶液の調製
Ａ法 溶媒抽出法
試料１００ｍｌを３００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ並びに酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、液相分離ろ紙を用いて３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。
Ｂ法 固相抽出法
試料１００ｍｌを、あらかじめアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１分間通気又は遠心分離を行い水分を除去する。アセトニトリル及び蒸留水の混液（６：４）１５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。
エ 高速液体クロマトグラフの操作条件
充てん剤 シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。
分離管 内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。
分離管槽温度 ４０℃
溶離液 蒸留水、アセトニトリル及び酢酸の混液（５５０：４５０：２）を用い、エチプロールが約１５分で流出するように流速を調整する。
検出器 波長２７５ｎｍで測定する。
感度 エチプロールの２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。
オ 検量線の作成
エチプロール標準品の５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、この溶液をアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）で希釈して、エチプロール０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを４０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高又はピーク面積、横軸に重量を取ってエチプロールの検量線を作成する。
カ 定量試験
Ａ法又はＢ法の試験溶液から４０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりエチプロールの重量を求め、これに基づき、試料中のエチプロールの濃度を算出する。