［平成一三・四・二六環告三二］
農薬取締法第三条第二項の規定により定められた同条第一項第四号から第七号までに掲げる場合に該当するかどうかの基準を定める等の件第四号の環境大臣の定める基準を定める件（平成五年四月環境庁告示第三十五号）の一部を次のように改正し、公布の日から適用する。
１の表（Ｅ）―Ｎ―（６―クロロ―３―ピリジルメチル）―Ｎ―エチル―Ｎ′―メチル―２―ニトロビニリデンジアミン（別名ニテンピラム）の項の次に次のように加える。
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３―（６―クロロ―３―ピリジルメチル）―１，３―チアゾリジン―２―イリデンシアナミド（別名チアクロプリド） |
０．３ｍｇ ／Ｌ |
１の表１―（２―クロロベンジル）―３―（１―メチル―１―フェニルエチル）尿素（別名クミルロン）の項の次に次のように加える。
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３―（２―クロロ―４―メシルベンゾイル）―２―フェニルチオビシクロ［３，２，１］オクタ―２―エン―４―オン（別名ベンゾビシクロン) |
０．４ｍｇ／Ｌ |
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４―（４―クロロ―２―メチルフェノキシ）酪酸エチル（別名ＭＣＰＢエチル） |
０．９ｍｇ／Ｌ |
１の表Ｓ―ベンジル １、２―ジメチルプロピル（エチル）チオカルバマート（別名エスプロカルブ）の項の次に次のように加える。
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Ｓ―２―（ベンゼンスルホンアミド）エチルＯ，Ｏ―ジイソプロピル ジチオホスファート（別名ベンスリド又はＳＡＰ） |
１ｍｇ／Ｌ |
２（１０５）から２（１２０）までを２（１０９）から２（１２４）までとし、２（１０４）を２（１０７）とし、２（１０７）の次に次のように加える。
（１０８） ベンスリド試験法
イ 試薬試液
アセトニトリル アセトニトリル（特級）
アセトン アセトン（特級）
塩化ナトリウム 塩化ナトリウム（特級）
酢酸エチル 酢酸エチル（特級）
ヘキサン ヘキサン（特級）
無水硫酸ナトリウム 無水硫酸ナトリウム（特級）
ケイ酸マグネシウムミニカラム 内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ケイ酸マグネシウム９１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
固相抽出カラム 内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
ベンスリド標準品 本品は、ベンスリド９９．０％以上を含み、融点は３６℃である。
ウ 試験溶液の調製
Ａ法 溶媒抽出法
１） 試料１００ｍｌを３００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム５ｇ並びにヘキサン及び酢酸エチルの混液（４：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（４：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをヘキサン及び酢酸エチルの混液（４：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
２） この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）４０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。
Ｂ法 固相抽出法
試料１００ｍｌを、あらかじめアセトニトリル５ｍｌ及び蒸留水５ｍｌを順に流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。アセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法の２）と同様の操作を行う。
エ 測定機器の操作条件
ガスクロマトグラフ部
分離管 内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜１５ｍの溶融シリカ製の管の内面にメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。
キャリヤーガス 高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。
試料導入部温度 スプリットレス方式を用い、２００〜２７０℃に設定する。
分離管槽昇温プログラム １００℃で２分保ち、１００〜約２８０℃の範囲で毎分１０〜２０℃の昇温を行う。
検出部
１） 質量分析計
インターフェース部温度 ２００〜２７０℃
イオン源温度 １５０℃以上
測定質量数 １４１、２１５、２５６
感度 ベンスリドの０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。
２） アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器
検出器温度 ２６０〜３００℃
ガス流量 水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。
感度 ベンスリドの０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。
オ 検量線の作成
ベンスリド標準品の０．１〜２ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってベンスリドの検量線を作成する。
カ 定量試験
試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりベンスリドの重量を求め、これに基づき、試料中のベンスリドの濃度を算出する。
２（４１）から２（１０３）までを２（４４）から２（１０６）までとし、２（４０）を２（４１）とし、２（４１）の次に次のように加える。
（４２） ベンゾビシクロン試験法
ア 装置 紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。
イ 試薬試液
アセトニトリル アセトニトリル（特級）
アセトン アセトン（特級）
塩化ナトリウム 塩化ナトリウム（特級）
酢酸 酢酸（特級）
酢酸エチル 酢酸エチル（特級）
ヘキサン ヘキサン（特級）
無水硫酸ナトリウム 無水硫酸ナトリウム（特級）
リン酸 リン酸（特級）
固相抽出カラム 内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用スチレンジビニルベンゼン共重合体（ポリスチレン系ゲル、粒径５０μｍ）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
シリカゲルミニカラム 内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
ベンゾビシクロン標準品 本品は、ベンゾビシクロン９９．０％以上を含み、融点は１８８〜１８９℃である。
３―（２―クロロ―４―メチルスルホニルベンゾイル）ビシクロ［３，２，１］オクタン―２，４―ジオン（以下「加水分解体」という。）標準品 本品は、加水分解体９９．０％以上を含み、融点は１６７〜１６８℃である。
ウ 試験溶液の調製
Ａ法 溶媒抽出法
１） 試料１００ｍｌを３００ｍｌの分液漏斗に量り取り、酢酸１ｍｌ、塩化ナトリウム５ｇ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
２）この残留物にヘキサン、アセトン及び酢酸の混液（１９：１：０．２）５ｍｌを加えて溶かす。あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン、アセトン及び酢酸の混液（１９：１：０．２）５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン、アセトン及び酢酸の混液（１９：１：０．２）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトン、ヘキサン及び酢酸の混液（３：２：０．０５）３０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。
Ｂ法 固相抽出法
試料１００ｍｌを２００ｍｌの三角フラスコに量り取り、酢酸１ｍｌを加える。これをあらかじめアセトニトリル５ｍｌ及び蒸留水５ｍｌを順に流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、１％酢酸及びアセトニトリルの混液（３：２）１０ｍｌで展開し、この流出液を捨てる。次いでアセトニトリル２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法の２）と同様の操作を行う。
エ 高速液体クロマトグラフの操作条件
充てん剤 シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。
分離管 内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。
分離管槽温度 ４０℃
溶離液 アセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（３：２：０．００５）を用い、ベンゾビシクロン及び加水分解体がそれぞれ１０〜１５分で流出するように流速を調整する。
検出器 波長２４０ｎｍで測定する。
感度 ベンゾビシクロン及び加水分解体のそれぞれ１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。
オ 検量線の作成
ベンゾビシクロン標準品及び加水分解体標準品のそれぞれ５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、各溶液を等量ずつ合わせ取ったものをアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）で希釈し、ベンゾビシクロン及び加水分解体０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれ２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってベンゾビシクロン及び加水分解体の検量線を作成する。
カ 定量試験
試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりベンゾビシクロン及び加水分解体の重量を求める。このベンゾビシクロンの重量の値と加水分解体の重量の値に係数１．２６を乗じてベンゾビシクロンの重量に換算したものとを和し、これに基づき、試料中のベンゾビシクロンの濃度を算出する。
（４３） ＭＣＰＢエチル試験法
ア 装置 紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。
イ 試薬試液
アセトニトリル アセトニトリル（特級）
塩化ナトリウム 塩化ナトリウム（特級）
塩酸 塩酸（特級）
酢酸エチル 酢酸エチル（特級）
水酸化ナトリウム 水酸化ナトリウム（特級）
ヘキサン ヘキサン（特級）
無水硫酸ナトリウム 無水硫酸ナトリウム（特級）
メタノール メタノール（特級）
固相抽出カラム 内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
４―（４―クロロ―ｏ―トリルオキシ）酪酸（以下「ＭＣＰＢ」という。）標準品 本品は、ＭＣＰＢ９９％以上を含み、融点は１００℃である。
２―メチル―４―クロロフェノキシ酢酸（以下「ＭＣＰＡ」という。）標準品 本品は、ＭＣＰＡ９８％以上を含み、融点は１１８〜１１９℃である。
ウ 試験溶液の調製
Ａ法 溶媒抽出法
１） 試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸２０ｍｌ、塩化ナトリウム１０ｇ及び酢酸エチル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を５００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、ときどき振り混ぜながら３０分間放置した後、５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
２） この残留物にメタノール２０ｍｌを加えて溶かし、次いで１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液２０ｍｌを加え、１０分間振とうする。
ナス型フラスコ中の溶液を１０％塩化ナトリウム溶液１００ｍｌで５００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、これにヘキサン５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、水層を分取する。この水層を５００ｍｌの分液漏斗に入れ、４ｍｏｌ／Ｌ塩酸１０ｍｌ及び酢酸エチル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を５００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、ときどき振り混ぜながら３０分間放置した後、５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、３ｍｌとして試験溶液とする。
Ｂ法 固相抽出法
試料２００ｍｌを５００ｍｌの三角フラスコに量り取り、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸２０ｍｌを加える。これを、あらかじめアセトニトリル５ｍｌ及び蒸留水５ｍｌを順に流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、アセトニトリル２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法の２）と同様の操作を行う。
エ 高速液体クロマトグラフの操作条件
T ＭＣＰＢ
充てん剤 シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。
分離管 内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。
分離管槽温度 ４０℃
溶離液 アセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（８０：２０：０．１）を用い、ＭＣ ＰＢが１０〜１５分で流出するように流速を調整する。
検出器 波長２３０ｎｍで測定する。
感度 ＭＣＰＢの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。
U ＭＣＰＡ
充てん剤 シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。
分離管 内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。
分離管槽温度 ４０℃
溶離液 アセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（５０：５０：０．１）を用い、ＭＣ ＰＡが８〜１２分で流出するように流速を調整する。
検出器 波長２３０ｎｍで測定する。
感度 ＭＣＰＡの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。
オ 検量線の作成
T ＭＣＰＢ
ＭＣＰＢ標準品の５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、この溶液をアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）で希釈して０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを４０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってＭＣＰＢの検量線を作成する。
U ＭＣＰＡ
ＭＣＰＡ標準品の５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、この溶液をアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）で希釈して０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを４０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってＭＣＰＡの検量線を作成する。
カ 定量試験
試験溶液から４０μｌを取り、T又はUの高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりＭＣＰＢ及びＭＣＰＡの重量を求める。このＭＣＰＢの重量の値に係数１．１２を乗じてＭＣＰＢエチルの値に換算したものと、このＭＣＰＡの重量の値に係数１．２８を乗じてＭＣＰＢエチルの値に換算したものとを和し、これに基づき、試料中のＭＣＰＢエチルの濃度を算出する。
２（３４）から２（３９）までを２（３５）から２（４０）までとし、２（３３）の次に次のように加える。
（３４） チアクロプリド試験法
ア 装置 紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。
イ 試薬試液
アセトニトリル アセトニトリル（特級）
アセトン アセトン（特級）
塩化ナトリウム 塩化ナトリウム（特級）
酢酸エチル 酢酸エチル（特級）
ヘキサン ヘキサン（特級）
無水硫酸ナトリウム 無水硫酸ナトリウム（特級）
固相抽出カラム 内径９ｍｍ、長さ６０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
シリカゲルミニカラム 内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
ＮＨ２シリカゲルミニカラム 内径９ｍｍ、長さ６０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＮＨ２シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの
チアクロプリド標準品 本品は、チアクロプリド９８．０％以上を含み、融点は１３５〜１３６℃である。
３―（６―クロロ―３―ピリジルメチル）―１，３―チアゾリジン―２―イリデンアミノカルボキサミド（以下「アミド体」という。）標準品 本品は、アミド体９８．０％以上を含み、融点は１５８〜１６０℃である。
ウ 試験溶液の調製
Ａ法 溶媒抽出法
１） 試料１００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、アセトン５ｍｌ、塩化ナトリウム１０ｇ及び酢酸エチル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を５００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及び酢酸エチルの混液（７：３）５ｍｌを加えて溶かす。
２） あらかじめ、ＮＨ２シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（７：３）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで酢酸エチル及びアセトンの混液（７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にへキサン及び酢酸エチルの混液（３：２）５ｍｌを加えて溶かす。
あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（３：２）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトン及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びアセトニトリルの混液（４：１）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。
Ｂ法 固相抽出法
試料１００ｍｌをあらかじめアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。アセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及び酢酸エチルの混液（７：３）５ｍｌを加えて溶かす。以下、Ａ法の２）と同じ操作を行う。
エ 高速液体クロマトグラフの操作条件
充てん剤 シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。
分離管 内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。
分離管槽温度 ４０℃
溶離液 蒸留水及びアセトニトリルの混液（４：１）を用い、チアクロプリドが２０〜２５分で流出するように流速を調整する。
検出器 波長２４０ｎｍで測定する。
感度 チアクロプリド及びアミド体のそれぞれ０．５ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。
オ 検量線の作成
チアクロプリド標準品及びアミド体標準品のそれぞれ５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、各溶液を等量ずつ合わせ取ったものを蒸留水及びアセトニトリルの混液（４：１）で希釈し、チアクロプリド及びアミド体０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってチアクロプリド及びアミド体の検量線を作成する。
カ 定量試験
試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりチアクロプリド及びアミド体の重量を求める。このチアクロプリドの重量の値とアミド体の重量の値に係数０．９３を乗じてチアクロプリドの値に換算したものとを和し、これに基づき、試料中のチアクロプリドの濃度を算出する。