○作物残留に係る農薬登録保留基準を改正する件

［平成一二・一二・二一　環告八○］

　農薬取締法第三条第二項の規定により定められた同条第一項第四号から第七号までに掲げる場合に該当するかどうかの基準を定める等の件第一号イの環境庁長官の定める基準を定める件（昭和四十八年七月環境庁告示第四十六号）の一部を次のように改正し、公布の日から適用する。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　１の表ペンタクロルニトロベンゼン（別名ＰＣＮＢ又はキントゼン）の項を削る。

　１の表３、７、９、１３─テトラメチル─５、１１─ジオキサ─２、８、１４─トリチア─４、７、９、１２─テトラアザペンタデカ─３、１２─ジエン─６、１０─ジオン（別名チオジカルブ）の項を次のように改める。

　１の表（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）─（１Ｒ、４Ｓ、５´Ｓ、６Ｒ、６´Ｒ、８Ｒ、１３Ｒ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）─２１、２４─ジヒドロキシ─５´、６´、１１、１３、２２─ペンタメチル─３、７、１９─トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ─１０、１４、１６、２２─テトラエン─６─スピロ─２´─テトラヒドロピラン─２─オン（以下「ミルベメクチンＡ₃」という。）及び（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）─（１Ｒ、４Ｓ、５´Ｓ、６Ｒ、６´Ｒ、８Ｒ、１３Ｒ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）─６´─エチル─２１、２４─ジヒドロキシ─５´、１１、１３、２２─テトラメチル─３、７、１９─トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ─１０、１４、１６、２２─テトラエン─６─スピロ─２´─テトラヒドロピラン─２─オン（以下「ミルベメクチンＡ₄」という。）の混合物（別名ミルベメクチン）の項を次のように改める。

　１の表１─［４─（２─クロロ─α、α、α─トリフルオロ─ｐ─トリルオキシ）─２─フルオロフェニル］─３─（２、６─ジフルオロベンゾイル）尿素（別名フルフェノクスロン）の項を次のように改める。

　１の表Ｎ─ｔｅｒｔ─ブチル─Ｎ´─（４─エチルベンゾイル）─３、５─ジメチルベンゾヒドラジド（別名テブフェノジド）の項を次のように改める。

　１の表（Ｓ）─α─シアノ─３─フェノキシベンジル（Ｚ）─（１Ｒ、３Ｓ）─２、２─ジメチル─３─［２─（２、２、２─トリフルオロ─１─トリフルオロメチルエトキシカルボニル）ビニル］シクロプロパンカルボキシラート（別名アクリナトリン）の項を次のように改める。

　１の表１─（２─シアノ─２─メトキシイミノアセチル）─３─エチル尿素（別名シモキサニル）の項を次のように改める。

　１の表４─ブロモ─２─（４─クロロフェニル）─１─エトキシメチル─５─（トリフルオロメチル）ピロール─３─カルボニトリル（別名クロルフェナピル）の項を次のように改める。

　１の表４─（２、２─ジフルオロ─１、３─ベンゾジオキソール─４─イル）ピロール─３─カルボニトリル（別名フルジオキソニル）の項を次のように改める。

　１の表（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）─（１Ｒ、４Ｓ、５´Ｓ、６Ｓ、６´Ｒ、８Ｒ、１２Ｓ、１３Ｓ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）─６´─［（Ｓ）─ｓｅｃ─ブチル］─２１、２４─ジヒドロキシ─５´、１１、１３、２２─テトラメチル─２─オキソ─３、７、１９─トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ─１０、１４、１６、２２─テトラエン─６─スピロ─２´─（５´、６´─ジヒドロ─２´Ｈ─ピラン）─１２─イル　２、６─ジデオキシ─３─Ｏ─メチル─４─Ｏ─（２、４、６─トリデオキシ─３─Ｏ─メチル─４─メチルアミノ─α─Ｌ─リキソ─ヘキソピラノシル）─α─Ｌ─アラビノ─ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ_１ａ安息香酸塩」という。）及び（１０Ｅ、１４Ｅ、１６Ｅ、２２Ｚ）─（１Ｒ、４Ｓ、５´Ｓ、６Ｓ、６´Ｒ、８Ｒ、１２Ｓ、１３Ｓ、２０Ｒ、２１Ｒ、２４Ｓ）─２１、２４─ジヒドロキシ─６´─イソプロピル─５´、１１、１３、２２─テトラメチル─２─オキソ─３、７、１９─トリオキサテトラシクロ［１５．６．１．１^４，８．０^{２０，２４}］ペンタコサ─１０、１４、１６、２２─テトラエン─６─スピロ─２´─（５´、６´─ジヒドロ─２´Ｈ─ピラン）─１２─イル　２、６─ジデオキシ─３─Ｏ─メチル─４─Ｏ─（２、４、６─トリデオキシ─３─Ｏ─メチル─４─メチルアミノ─α─Ｌ─リキソ─ヘキソピラノシル）─α─Ｌ─アラビノ─ヘキソピラノシド　ベンゾアート（以下「エマメクチンＢ_１ｂ安息香酸塩」という。）の混合物（別名エマメクチン安息香酸塩）の項を次のように改める。

　１の表メチル　（Ｅ）─２─［２─［６─（２─シアノフェノキシ）ピリミジン─４─イルオキシ］フェニル］─３─メトキシアクリラート（別名アゾキシストロビン）の項を次のように改める。

　１の表４─シクロプロピル─６─メチル─Ｎ─フェニルピリミジン─２─アミン（別名シプロジニル）の項を次のように改める。

　１の表（±）─２─（２、４─ジクロロフェニル）─３─（１Ｈ─１、２、４─トリアゾール─１─イル）プロピル　１、１、２、２─テトラフルオロエチル　エーテル（別名テトラコナゾール）の項を次のように改める。

　１の表（２Ｒ、３ａＳ、５ａＲ、５ｂＳ、９Ｓ、１３Ｓ、１４Ｒ、１６ａＳ、１６ｂＲ）─２─（６─デオキシ─２、３、４─トリ─Ｏ─メチル─α─Ｌ─マンノピラノシルオキシ）─１３─（４─ジメチルアミノ─２、３、４、６─テトラデオキシ─β─Ｄ─エリスロピラノシルオキシ）─９─エチル─２、３、３ａ、５ａ、５ｂ、６、７、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６ａ、１６ｂ─ヘキサデカヒドロ─１４─メチル─１Ｈ─８─オキサシクロドデカ［ｂ］ａｓ─インダセン─７、１５─ジオン（以下「スピノシンＡ」という。）及び（２Ｒ、３ａＲ、５ａＳ、５ｂＳ、９Ｓ、１３Ｓ、１４Ｒ、１６ａＳ、１６ｂＲ）─２─（６─デオキシ─２、３、４─トリ─Ｏ─メチル─α─Ｌ─マンノピラノシルオキシ）─１３─（４─ジメチルアミノ─２、３、４、６─テトラデオキシ─β─Ｄ─エリスロピラノシルオキシ）─９─エチル─２、３、３ａ、５ａ、５ｂ、６、７、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６ａ、１６ｂ─ヘキサデカヒドロ─４、１４─ジメチル─１Ｈ─８─オキサシクロドデカ［ｂ］ａｓ─インダセン─７、１５─ジオン（以下「スピノシンＤ」という。）の混合物（別名スピノサド）の項を次のように改める。

　１の表メチル　３─クロロ─５─（４、６─ジメトキシピリミジン─２─イルカルバモイルスルファモイル）─１─メチルピラゾール─４─カルボキシラート（別名ハロスルフロンメチル）の項を次のように改める。

　１の表Ｎ─（４、６─ジメチルピリミジン─２─イル）アニリン（別名ピリメタニル）の項を次のように改める。

　１の表２´─ｔｅｒｔ─ブチル─５─メチル─２´─（３、５─キシロイル）クロマン─６─カルボヒドラジド（別名クロマフェノジド）の項を次のように改める。

　１の表３─アニリノ─５─メチル─５─（４─フェノキシフェニル）─１、３─オキサゾリジン─２、４─ジオン（別名ファモキサドン）の項を次のように改める。

　１の表３─［１─（３、５─ジクロロフェニル）─１─メチルエチル］─３、４─ジヒドロ─６─メチル─５─フェニル─２Ｈ─１、３─オキサジン─４─オン（別名オキサジクロメホン）の項の次に次のように加える。

　２（１３）を次のように改める。

　（１３）　削除

　２（２０７）ウＢ法中「抹茶」を「茶」に改め、２（２０７）ウＣ法を削る。

　２（２５５）ウＡ法中「野菜」の次に「、いも類」を、「、１０ｍｌ」の次に「（いも類の場合は５ｍｌ）」を加える。　

　２（３０９）ウＡ法中「果実（いちごを除く。）及び野菜」を「麦・雑穀、果実（いちごを除く。）、野菜及びいも類」に改める。

　２（３１８）を次のように改める。

　（３１８）　テトラコナゾール試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトン　アセトン（特級）

　塩化アンモニウム　塩化アンモニウム（特級）

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ジエチレングリコール　ジエチレングリコール（特級）

　トルエン トルエン（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　リン酸　リン酸（特級）

　ケイ酸マグネシウムミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　凝固液　塩化アンモニウム２ｇにリン酸４ｍｌ及び蒸留水４００ｍｌを加えたもの

　テトラコナゾール標準品　本品は、テトラコナゾール９９％以上を含み、融点は─３７℃である。

ウ　試験溶液の調製
Ａ法（果実、野菜及びてんさいの場合）
１）　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、アセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうし、１６時間放置した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうし、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液を５％塩化ナトリウム溶液１００ｍｌ、次いで酢酸エチル５０ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌを加えて溶かす。

２）　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（１７：３）３０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

３）　この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）２５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（１７：３）３０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にトルエンを加えて溶かし、４ｍｌとして試験溶液とする。

Ｂ法（茶の場合）
　試料５ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうし、１６時間放置した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうし、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。全ろ液にアセトンを加え、２５０ｍｌとする。この溶液の５０ｍｌを２００ｍｌのナス型フラスコに分取し、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で５ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液にアセトン３０ｍｌ、凝固液５０ｍｌ及びケイソウ土２ｇを加えて緩やかに振り混ぜ、５分間放置した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。使用したナス型フラスコを凝固液及びアセトンの混液（５：３）５０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、吸引ろ過する。全ろ液を３００ｍｌの分液漏斗に合わせ、酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、この洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びメタノールの混液（３：２）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びメタノールの混液（３：２）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでメタノール及び蒸留水の混液（７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトン１ｍｌを加えて溶かし、ヘキサン１９ｍｌを加える。以下、この溶液についてＡ法の２）と同様の操作を行う。この残留物にトルエンを加えて溶かし、１ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件
　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は１５０〜２００℃

　分離管槽昇温プログラム　１５０℃で１分保ち、１５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　テトラコナゾールの０．４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成
　テトラコナゾール標準品の０．２〜４ｍｇ／Ｌトルエン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってテトラコナゾールの検量線を作成する。

カ　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりテトラコナゾールの重量を求め、これに基づき、検体中のテトラコナゾールの濃度を算出する。

　２（３３１）を次のように改める。

　（３３１）　ハロスルフロンメチル試験法

ア　装置　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　塩酸　塩酸（特級）

　ぎ酸　ぎ酸（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　リン酸　リン酸（特級）

　アルミナミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用酸性アルミナ１７１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　グラファイトカーボンミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用グラファイトカーボン５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用アミノプロピル（ＮＨ_２）シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ハロスルフロンメチル標準品　本品は、ハロスルフロンメチル９９％以上を含み、融点は１７５〜１７８℃である。

ウ　試験溶液の調製
　検体１０ｇ相当の試料（米の場合は、試料１０ｇに水２０ｍｌを加えて２時間放置したもの）を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（８０：２０：１）１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（８０：２０：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で３０ｍｌに濃縮する。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ及び蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、０．１ｍｏｌ／Ｌ塩酸及びアセトニトリルの混液（７：３）１０ｍｌ並びに蒸留水１０ｍｌで展開し、これらの流出液を捨てる。次いでアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌの三角フラスコに取る。
　あらかじめ、グラファイトカーボンミニカラムに酢酸エチル５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これに三角フラスコ中の溶液を流し入れ、メタノール５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで酢酸エチル、メタノール及びぎ酸の混液（７０：３０：１）３０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ＮＨ_２シリカゲルミニカラムに酢酸エチル及びぎ酸の混液（１００：１）５ｍｌ並びにアセトニトリル５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、アセトニトリル２０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで酢酸エチル及びぎ酸の混液（１００：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に酢酸エチル及びメタノールの混液（７：３）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、アルミナミニカラムにメタノール５ｍｌ及び酢酸エチル５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、酢酸エチル及びメタノールの混液（７：３）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

エ　高速液体クロマトグラフの操作条件
　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　アセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（６０：４０：０．１）を用い、ハロスルフロンメチルが１０〜１５分で流出するように流速を調整する。

　検出器　波長２４５ｎｍで測定する。

　感度　ハロスルフロンメチルの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成
　ハロスルフロンメチル標準品の０．０５〜１ｍｇ／Ｌアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってハロスルフロンメチルの検量線を作成する。

カ　定量試験
　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりハロスルフロンメチルの重量を求め、これに基づき、検体中のハロスルフロンメチルの濃度を算出する。

　２（３３３）ウ中「検体２０ｇ相当の試料」の次に「（みかん以外のかんきつ類の場合は検体１０ｇ相当の試料）」を加える。

　２（３３４）イ中「多孔性ケイソウ土カラム　内径約２ｃｍのカラムに２０ｍｌ保持量のカラムクロマトグラフィー用顆粒状多孔性ケイソウ土を充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの」を削り、２（３３４）ウＡ法中「多孔性ケイソウ土カラムに流し入れ、１０分間放置する。酢酸エチル１２０ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌのナス型フラスコに取り」を「５％塩化ナトリウム溶液１００ｍｌ、次いで酢酸エチル５０ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ」に改める。

　２（３４３）の次に次のように加える。

　（３４４）　フェントラザミド試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　エタノール　エタノール（特級）

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　塩酸　塩酸（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ジメチルスルホキシド　ジメチルスルホキシド（水分０．１％以下のもの）

　水素化ナトリウム　ヘキサンで洗浄したものを同溶媒中に保存したもの

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　ヨウ化メチル　ヨウ化メチル（特級）

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　シリカゲル　カラムクロマトグラフィー用シリカゲル

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　１─（２─クロロフェニル）─４，５─ジヒドロ─１Ｈ─テトラゾール─５─オン（以下「ＣＰＴ」という。）標準品　本品は、ＣＰＴ９７％以上を含み、融点は１２０℃である。

ウ　試験溶液の調製
１）　試料２０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水４０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトニトリル１００ｍｌを加え、５分間細砕した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル及び水の混液（５：２）５０ｍｌを加え、同様の細砕及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で６０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液を５％塩化ナトリウム溶液５０ｍｌ、次いで酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物をアセトニトリル飽和ヘキサン３０ｍｌ、次いでヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌで１００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、アセトニトリル層を分取する。残ったヘキサン層についても、ヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全アセトニトリル層を２００ｍｌの分液漏斗に合わせ、アセトニトリル飽和ヘキサン５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、アセトニトリル層を２００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、１３０℃で４時間加熱して活性化したシリカゲル５ｇをヘキサンでクロマト管（内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのガラス管）に充てんし、その上に無水硫酸ナトリウム５ｇをヘキサンで充てんしておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）５０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（４：１）８０ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にエタノール４ｍｌ及び１２ｍｏｌ／Ｌ塩酸１６ｍｌを加え、空冷管をつけて時々振り混ぜながら、７０℃で１時間放置する。１０％塩化ナトリウム溶液４０ｍｌ及び酢酸エチル３０ｍｌで２００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル３０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を２００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、２００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

２）　この残留物にヘキサン０．５ｍｌを加えて溶かす。この溶液にジメチルスルホキシド０．５ｍｌ、水素化ナトリウム約２０ｍｇ及びヨウ化メチル０．５ｍｌを加え、栓をして時々振り混ぜながら室温で１５分間放置する。蒸留水１０ｍｌを徐々に滴下して加え、水素ガスの発生が止まった後、反応液を蒸留水１０ｍｌ、次いで酢酸エチル２０ｍｌで１００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル２０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を２００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、２００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

３）　この残留物にヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（４：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件
　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　ＣＰＴの０．０５ｎｇが、十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成
　ＣＰＴ標準品の５００ｍｇ／Ｌアセトン溶液を調製し、この１ｍｌを１００ｍｌのナス型フラスコに取り、室温で窒素ガスを通じて溶媒を除去する。以下、この残留物についてウの２）と同様の操作を行い、その残留物にアセトンを加えて溶かし、５０ｍｌとする。この溶液をアセトンで希釈し、０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってＣＰＴの検量線を作成する。

カ　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりＣＰＴの重量を求め、これに係数１．７８を乗じてフェントラザミドの重量に換算し、これに基づき、検体中のフェントラザミドの濃度を算出する。

　（３４５）　テブコナゾール試験法

　食品、添加物等の規格基準（昭和３４年１２月厚生省告示第３７０号）第１　食品の部Ｄ　各条の項の○　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの２　穀類、豆類、果実、野菜、種実類、茶及びホップの成分規格の試験法の目に規定するテブコナゾールの試験法による。

　（３４６）　フェノキサニル試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　多孔性ケイソウ土カラム　内径約２ｃｍのカラムに２０ｍｌ保持量のカラムクロマトグラフィー用顆粒状多孔性ケイソウ土を充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　フェノキサニル標準品　本品はフェノキサニル９９．４％以上を含み、融点は６９〜７１．５℃である。

ウ　試験溶液の調製
　試料１０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトニトリル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトニトリル５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　この溶液を多孔性ケイソウ土カラムに流し入れ、１０分間放置する。ヘキサン１００ｍｌで展開し、溶出液を３００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（４：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件
　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　フェノキサニルの０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成
　フェノキサニル標準品の０．１〜２ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってフェノキサニルの検量線を作成する。

カ　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりフェノキサニルの重量を求め、これに基づき、検体中のフェノキサニルの濃度を算出する。

　（３４７）　カズサホス試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　ケイ酸マグネシウムミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　カズサホス標準品　本品はカズサホス９８．１％以上を含み、融点は─２０℃である。

ウ　試験溶液の調製
　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、アセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ及び蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（９７：３）５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及び酢酸エチルの混液（１９：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、５ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件
　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　カズサホスの０．０４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成
　カズサホス標準品の０．０２〜０．１ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってカズサホスの検量線を作成する。

カ　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりカズサホスの重量を求め、これに基づき、検体中のカズサホスを算出する。