○作物残留に係る農薬登録保留基準を改正する件

　　　〔平成一二・四・二八　環告三二〕

　農薬取締法第三条第二項の規定により定められた同条第一項第四号から第七号までに掲げる場合に該当するかどうかの基準を定める等の件第一号イの環境庁長官の定める基準を定める件（昭和四十八年七月環境庁告示第四十六号）の一部を次のように改正し、公布の日から適用する。

　１の表３―クロロ―Ｎ―（３―クロロ―５―トリフルオロメチル―２―ピリジル）―α、α、α―トリフルオロ―２、６―ジニトロ―ｐ―トルイジン（別名フルアジナム）の項を次のように改める。

　１の表（ＲＳ）―Ｓ―ｓｅｃ―ブチル　Ｏ―エチル　２―オキソ―１、３―チアゾリジン―３―イルホスホノチオアート（別名ホスチアゼート）の項を次のように改める。

　１の表２―メチルビフェニル―３―イルメチル　（Ｚ）―（１ＲＳ、３ＲＳ）―３―（２―クロロ―３、３、３―トリフルオロプロペン―１―イル）―２、２―ジメチルシクロプロパンカルボキシラート（別名ビフェントリン）の項を次のように改める。

　１の表４―ブロモ―２―（４―クロロフェニル）―１―エトキシメチル―５―（トリフルオロメチル）ピロール―３―カルボニトリル（別名クロルフェナピル）の項を次のように改める。

　１の表メチル　（Ｅ）―２―メトキシイミノ―２―［２―（ｏ―トリルオキシメチル）フェニル］アセタート（別名クレソキシムメチル）の項を次のように改める。

　１の表Ｎ―（２、３―ジクロロ―４―ヒドロキシフェニル）―１―メチルシクロヘキサンカルボキサミド（別名フェンヘキサミド）の項を次のように改める。

　１の表２´―ｔｅｒｔ―ブチル―５―メチル―２´―（３、５―キシロイル）クロマン―６―カルボヒドラジド（別名クロマフェノジド）の項の次に次のように加える。

　２（３１０）を次のように改める。

（３１０）　クレソキシムメチル試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　ジエチルエーテル　ジエチルエーテル（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　シリカゲル　カラムクロマトグラフィー用シリカゲル

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　クレソキシムメチル標準品　本品は、クレソキシムメチル９９％以上を含み、融点は１０２℃である。

ウ　試験溶液の調製

　Ａ法（麦・雑穀の場合）

１）　試料２０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水４０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で４０ｍｌに濃縮する。

２）　この濃縮液を５％塩化ナトリウム溶液１００ｍｌ、次いでヘキサン５０ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、ヘキサン層を分取する。残った水層についても、ヘキサン５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全ヘキサン層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをヘキサン２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

３）　この残留物をアセトニトリル飽和ヘキサン３０ｍｌ、次いでヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌで１００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、アセトニトリル層を分取する。残ったヘキサン層についても、ヘキサン飽和アセトニトリル３０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全アセトニトリル層を２００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

４）　この残留物にヘキサンを加えて溶かし、１０ｍｌとする。 
　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液の５ｍｌを分取して流し入れ、ヘキサン及びジエチルエーテルの混液（４９：１）２０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びジエチルエーテルの混液（１９：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にヘキサンを加えて溶かし、５ｍｌとして試験溶液とする。

　Ｂ法（果実及び野菜の場合）

　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、アセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液についてＡ法の２）及び４）と同様の操作を行う。

　Ｃ法（茶の場合）

　試料５ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。この濃縮液についてＡ法の２）と同様の操作を行う。この残留物にヘキサン１０ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、１３０℃で１６時間加熱して活性化したシリカゲル１０ｇをヘキサンでクロマト管（内径１．５〜２ｃｍ、長さ３０ｃｍのガラス管）に充てんし、その上に無水硫酸ナトリウム５ｇをヘキサンで充てんしておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びジエチルエーテルの混液（１９：１）１００ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びジエチルエーテルの混液（７：３）１００ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物についてＡ法の４）と同様の操作を行う。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ５〜１５ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２６０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　クレソキシムメチルの０．０４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　クレソキシムメチル標準品の０．０２〜０．４ｍｇ／Ｌヘキサン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってクレソキシムメチルの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりクレソキシムメチル（Ｚ体を含む。）の重量を求め、これに基づき、検体中のクレソキシムメチルの濃度を算出する。

　２（３３４）の次に次のように加える。

（３３５）　ファモキサドン試験法

ア　装置　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ジエチルエーテル　ジエチルエーテル（特級)

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　アルミナミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用中性アルミナ１７１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径９ｍｍ、長さ６０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　多孔性ケイソウ土カラム　内径約２ｃｍのカラムに２０ｍｌ保持量のカラムクロマトグラフィー用顆粒状多孔性ケイソウ土を充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ファモキサドン標準品　本品は、ファモキサドン９９．４％以上を含み、融点は１４２．４〜１４３．３℃である。

ウ　試験溶液の調製

　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液を多孔性ケイソウ土カラムに流し入れ、１０分間放置する。ヘキサン及び酢酸エチルの混液（９：１）１２０ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（３：２）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、アルミナミニカラムにアセトン５ｍｌ、次いでヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（３：２）１５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びジエチルエーテルの混液（１７：３）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びジエチルエーテルの混液（１７：３）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びジエチルエーテルの混液（７：３）１５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びメタノールの混液（１：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ 、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びメタノールの混液（１：１）１５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでメタノール及び蒸留水の混液（７：３）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、４ｍｌとして試験溶液とする。

エ　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　アセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を用い、ファモキサドンが１４〜２０分で流出するように流速を調整する。

　検出器　波長２３０ｎｍで測定する。

　感度　ファモキサドンの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　ファモキサドン標準品の０．０５〜１ｍｇ／Ｌアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってファモキサドンの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりファモキサドンの重量を求め、これに基づき、検体中のファモキサドンの濃度を算出する。

（３３６）　カーバムアンモニウム塩試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器、高感度窒素・リン検出器又は炎光光度型検出器付きガスクロマトグラフ及び蒸留装置（（１５４）　メチルイソチオシアネート試験法の別図（以下、（３３６）において「別図」という。）に掲げる構成のもの）を用いる。

イ　試薬試液

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　シリコン　消泡用シリコン

　リン酸水素二ナトリウム　リン酸水素二ナトリウム（特級）

　リン酸二水素カリウム　リン酸二水素カリウム（特級）

　液相分離ろ紙　液相分離ろ紙（化学分析用ろ紙をシリコン処理したもの）

　０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液　０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム溶液に０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸水素二ナトリウム溶液を加えてｐＨを６．７に調整したもの

　メチルイソチオシアネート標準品　本品は、メチルイソチオシアネート９７．０％以上を含み、融点は３５〜３６℃である。

ウ　試験溶液の調製

　検体５０ｇ相当の試料を蒸留装置の丸底フラスコに量り取り、０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液２５０ｍｌ、シリコン約１ｍｌ及び酢酸エチル１０ｍｌを加え、４０分間加熱還流する。
　終了後、トラップ（別図の�@）の部分の水及び酢酸エチルを１００ｍｌの分液漏斗にとり、塩化ナトリウム１５ｇを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取し、液相分離ろ紙を用いてろ過し試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面にポリエチレングリコールを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　炎光光度型検出器のフィルター　イオウ用干渉フィルター（波長３９４ｎｍ）を用いる。

　分離管槽温度 ８０℃

　試料導入部温度　２５０℃

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　メチルイソチオシアネートの０．０３ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　メチルイソチオシアネート標準品の０．０１５〜０．３ｍｇ／Ｌ酢酸エチル溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってメチルイソチオシアネートの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりメチルイソチオシアネートの重量を求め、これに係数１．７０を乗じてカーバムアンモニウム塩の重量に換算し、これに基づき、検体中のカーバムアンモニウム塩の濃度を算出する。

（３３７）　トリネキサパックエチル試験法

ア　装置　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　ジエチルエーテル　ジエチルエーテル（特級）

　炭酸水素ナトリウム　炭酸水素ナトリウム（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　リン酸　リン酸（特級）

　液相分離ろ紙　液相分離ろ紙（化学分析用ろ紙をシリコン処理したもの）

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ１３ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＳＡＸシリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＳＡＸシリカゲル（シリカゲルにトリメチルアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　４―（シクロプロピル―α―ヒドロキシ―メチレン）―３，５―ジオキソシクロヘキサン酢酸（以下「トリネキサパック」という。）標準品　本品は、トリネキサパック９７．０％以上を含み、融点は１４４．４℃である。

　トリネキサパックエチル標準品　本品は、トリネキサパックエチル９９．３％以上を含み、融点は３６．１〜３６．６℃である。

ウ　試験溶液の調製

１）　試料１０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにメタノール及び０．５％リン酸の混液（４：１）１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してメタノール及び０．５％リン酸の混液（４：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液にメタノールを加えて２００ｍｌとする。この１００ｍｌを５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液を蒸留水３０ｍｌ、次いでジエチルエーテル及びヘキサンの混液（７：３）１００ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、リン酸３ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、ジエチルエーテル及びヘキサンの混液（７：３）１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、液相分離ろ紙を用いて、５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをジエチルエーテル及びヘキサンの混液（７：３）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に５％リン酸５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ 、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びメタノールの混液（１７：３）２０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで蒸留水及びメタノールの混液（１３：７）１５ｍｌ、続いて蒸留水及びメタノールの混液（１：１）２０ｍｌで展開し、初めの溶出液１５ｍｌを５０ｍｌのナス型フラスコに取り、トリネキサパック溶出液とする。さらに次の溶出液２０ｍｌを１００ｍｌのナス型フラスコに取り、トリネキサパックエチル溶出液とする。

２）　トリネキサパックエチル溶出液を、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）を加えて溶かし、２ｍｌとしてトリネキサパックエチルの試験溶液とする。

３）　トリネキサパック溶出液に、０．５ｍｏｌ／Ｌ炭酸水素ナトリウム溶液を加えてｐＨ６〜７に調整する。これを、あらかじめメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておいたＳＡＸシリカゲルミニカラムに流し入れ、メタノール１０ｍｌで展開し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。メタノール及びリン酸の混液（１９９：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びアセトニトリルの混液（４：１）を加えて溶かし、３ｍｌとしてトリネキサパックの試験溶液とする。

エ　高速液体クロマトグラフの操作条件

�T　トリネキサパックエチル

　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　０．５％リン酸及びアセトニトリルの混液（３：２）を用い、トリネキサパックエチルが１０〜１５分で流出するように流速を調整する。

　検出器　波長２８０ｎｍで測定する。

　感度　トリネキサパックエチルの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

�U　トリネキサパック

　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　０．５％リン酸及びアセトニトリルの混液（４：１）を用い、トリネキサパックが３０〜３５分で流出するように流速を調整する。

　検出器　波長２８０ｎｍで測定する。

　感度　トリネキサパックの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

�T　トリネキサパックエチル

　トリネキサパックエチル標準品の０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌ蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）溶液を数点調製し、それぞれを４０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってトリネキサパックエチルの検量線を作成する。

�U　トリネキサパック

　トリネキサパック標準品の０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌ蒸留水及びアセトニトリルの混液（４：１）溶液を数点調製し、それぞれを４０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってトリネキサパックの検量線を作成する。

カ　定量試験

　トリネキサパックエチル及びトリネキサパックの試験溶液からそれぞれ４０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの検量線によりトリネキサパックエチル及びトリネキサパックの重量を求める。このトリネキサパックエチルの重量の値と、トリネキサパックの重量の値に係数１．１３を乗じてトリネキサパックエチルの重量に換算したものを合計し、これに基づき、検体中のトリネキサパックエチルの濃度を算出する。

（３３８）　テプラロキシジム試験法

ア　装置　ガスクロマトグラフ質量分析計を用いる。

イ　試薬試液

　アセトン　アセトン（特級）

　イソプロパノール　イソプロパノール（特級）

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　塩酸　塩酸（特級）

　オルトぎ酸トリメチル　オルトぎ酸トリメチル（純度９８％以上のもの）

　過酸化水素水　過酸化水素水（特級）

　ぎ酸　ぎ酸（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル（特級）

　ジエチルエーテル　ジエチルエーテル（特級）

　水酸化カリウム　水酸化カリウム（特級）

　水酸化カルシウム　水酸化カルシウム（特級）

　炭酸水素ナトリウム　炭酸水素ナトリウム（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　ペルオキソ二硫酸カリウム　ペルオキソ二硫酸カリウム（純度９５％以上のもの）

　無水硫酸ナトリウム　無水硫酸ナトリウム（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　硫酸　硫酸（特級）

　活性炭　化学分析用活性炭

　ケイ酸マグネシウム　カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム

　ケイソウ土　化学分析用ケイソウ土

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ１３ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ１３ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用アミノプロピル（ＮＨ_２）シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ジメチル　３―（３，４，５，６―テトラヒドロ―２Ｈ―ピラン―４―イル）グルタラート（以下、「ＤＭＰ」という。）標準品　本品は、ＤＭＰ９９．０％以上を含み、屈折率は１．４６６２である。

　ジメチル　３―ヒドロキシ―３―（３，４，５，６―テトラヒドロ―２Ｈ―ピラン―４―イル）グルタラート（以下、「ＯＨ―ＤＭＰ」という。）標準品　本品は、ＯＨ―ＤＭＰ９９．０％以上を含み、融点は６７〜６８℃である。

ウ　試験溶液の調製

　検体２０ｇ相当の試料（豆類の場合は試料１０ｇに水２０ｍｌを加えて２時間放置したもの）を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、メタノール及び蒸留水の混液（４：１）１５０ｍｌを加え、５分間細砕した後、ケイソウ土を１ｃｍの厚さに敷いたろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してメタノール及び蒸留水の混液（４：１）１５０ｍｌを加え、同様の細砕及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で３０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液に蒸留水７０ｍｌを加えた後、イソプロパノールを加えて３００ｍｌとする。この１５０ｍｌを３００ｍｌの三角フラスコに取り、水酸化カルシウム５ｇを加えて緩やかに振り混ぜた後、ろ紙を用いて吸引ろ過する。（豆類の場合は、濃縮液に蒸留水２０ｍｌ、イソプロパノール１００ｍｌ及び水酸化カルシウム５ｇを加えて緩やかに振り混ぜた後、ろ紙を用いて吸引ろ過する。）使用した三角フラスコをイソプロパノール及び蒸留水の混液（４：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、同様にろ過する。全ろ液を５００ｍｌの三角フラスコに合わせ、水酸化カリウム１ｇを加え、撹拌子を投入し、還流冷却器を付けて撹拌しながら加熱還流する。還流開始直後に過酸化水素水３ｍｌを還流冷却器上から滴下して加え、１０分間隔で過酸化水素水３ｍｌを滴下して加える操作を３回繰り返した後、さらに３０分間加熱還流する。冷後、塩化ナトリウム２５ｇを加え１０分間撹拌する。三角フラスコから撹拌子を取り出し、溶液を飽和塩化ナトリウム溶液２０ｍｌで５００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、暫時放置した後、水層を分取する。残った有機溶媒層についても、飽和塩化ナトリウム溶液５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、水層を分取する。全水層を３００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、塩酸５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて５０〜６０℃でイソプロパノールを完全に留去する。
　これに残留物が溶解するまで蒸留水を加えた後、活性炭２．５ｇを加え、振とう機を用いて１０分間激しく振とうする。溶液をろ紙を用いて吸引ろ過し、使用したナス型フラスコを蒸留水２００ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の活性炭を洗った後、５分間吸引を続け水分を除去する。次いでヘキサン１００ｍｌでろ紙上の活性炭を洗い、５分間吸引を続け、活性炭を乾燥させる。
　ろ紙上の活性炭及び５ｍｍ角に切断したろ紙を５００ｍｌの三角フラスコに移す。これにメタノール１００ｍｌ、ペルオキソ二硫酸カリウム２ｇ、オルトぎ酸トリメチル２５ｍｌ及び硫酸２０ｍｌを加え、撹拌子を投入し、還流冷却器を付けて１時間撹拌しながら加熱還流する。終了後、冷却器をメタノール５０ｍｌで洗い、洗液を三角フラスコに合わせる。これを５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ紙を用いてろ過し、使用した三角フラスコをメタノール及びぎ酸の混液（９：１）１００ｍｌで洗い、その洗液でろ過器上を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて５０〜６０℃で８０ｍｌに濃縮する。
　この濃縮液を蒸留水３００ｍｌ、次いで酢酸エチル１５０ｍｌで１０００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても酢酸エチル１５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。
　全酢酸エチル層を５００ｍｌの分液漏斗に合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム溶液５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。
　全酢酸エチル層を５００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトン１ｍｌを加えて溶かし、ヘキサン１９ｍｌを加える。
　あらかじめ、ケイ酸マグネシウム１０ｇをヘキサンでクロマト管（内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのガラス管）に充てんし、その上に無水硫酸ナトリウム５ｇをヘキサンで充てんしておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）６０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（４：１）８０ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にジエチルエーテル３ｍｌを加えて溶かし、ヘキサン１２ｍｌを加える。
　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びジエチルエーテルの混液（４：１）１５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にメタノール０．５ｍｌを加えて溶かし、蒸留水９．５ｍｌを加える。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びメタノールの混液（１：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトンを加えて溶かし、３ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフ質量分析計の操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．２５ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面にフェニルポリシルフェニレンシロキサンを０．１〜０．２５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス　ヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．２５ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　１００℃で２分保ち、１００〜約２００℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　インターフェース部温度　２００〜２７０℃

　イオン源温度　１５０℃以上

　測定質量数　ＤＭＰの場合は、２１３、１８２、１６８、ＯＨ―ＤＭＰの場合は、１７５、１５５、１４３

　感度　ＤＭＰ及びＯＨ―ＤＭＰのそれぞれ０．０５ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　ＤＭＰ及びＯＨ―ＤＭＰ標準品のそれぞれ０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってＤＭＰ及びＯＨ―ＤＭＰの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりＤＭＰ及びＯＨ―ＤＭＰの重量を求める。このＤＭＰ及びＯＨ―ＤＭＰの重量の値にそれぞれ係数１．４０及び１．３１を乗じてテプラロキシジムの重量に換算したものを合計し、これに基づき、検体中のテプラロキシジムの濃度を算出する。

（３３９）　ジクロシメット試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　アルミナミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用塩基性アルミナ１７１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用アミノプロピル（ＮＨ_２）シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　（Ｒ）―２―シアノ―Ｎ―［（Ｒ）―１―（２，４―ジクロロフェニル）エチル］―３，３―ジメチルブチラミド（以下、「ＲＲ体」という。）及び（Ｓ）―２―シアノ―Ｎ―［（Ｒ）―１―（２，４―ジクロロフェニル）エチル］―３，３―ジメチルブチラミド（以下、「ＳＲ体」という。）の混合物（以下、「ジクロシメット」という。）標準品　本品はジクロシメット９９．０％以上を含み、融点は１６１℃である。

ウ　試験溶液の調製

　試料１０ｇを３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、水２０ｍｌを加えて２時間放置する。これにアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）８ｍｌで展開し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。次いで、アセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ＮＨ_２シリカゲルミニカラムの下にアルミナミニカラムを連結し、これにヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで、ヘキサン及びアセトンの混液（４：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　ジクロシメットの０．１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　ジクロシメットの０．０５〜１ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にＲＲ体のピーク高及びＳＲ体のピーク高の和、横軸に重量を取ってジクロシメットの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりジクロシメットの重量を求め、これに基づき、検体中のジクロシメットの濃度を算出する。

（３４０）　オキスポコナゾールフマル酸塩試験法

ア　装置　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフ並びにアルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトン　アセトン（特級）

　酢酸エチル　酢酸エチル(特級)

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　リン酸水素二ナトリウム　リン酸水素二ナトリウム（特級）

　リン酸二水素カリウム　リン酸二水素カリウム（特級）

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　ケイ酸マグネシウムミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用アミノプロピル（ＮＨ_２）シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　多孔性ケイソウ土カラム　内径約２ｃｍのカラムに２０ｍｌ保持量のカラムクロマトグラフィー用顆粒状多孔性ケイソウ土を充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液　０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸水素二ナトリウム溶液に０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム溶液を加えてｐＨを７．５に調整したもの

　オキスポコナゾールフマル酸塩標準品　本品は、オキスポコナゾールフマル酸塩９９．９５％以上を含み、融点は１２３．６〜１２４．５℃である。

　２―［３―（４―クロロフェニル）プロピル］―Ｎ―ホルミル―２，４，４―トリメチルオキサゾリジン―３―カルボキサミド（以下、「ホルミル体」という。）標準品　本品は、ホルミル体９７．６３％以上を含み、融点は１００．５〜１０２℃である。

　４，４―ジメチル―２―オキサゾリジノン（以下、「オキサゾリジノン」という。）標準品　本品は、オキサゾリジノン９９．３％以上を含み、融点は５７〜５８℃である。

ウ　試験溶液の調製

１）　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、これに０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（みかん以外のかんきつ類の場合は０．１ｍｏｌ／Ｌリン酸水素二ナトリウム溶液）１０ｍｌ及びアセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で３０ｍｌに濃縮する。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ 、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びメタノールの混液（１：１）５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌの三角フラスコに取り、これをオキサゾリジノン溶出液とする。次いで、メタノール１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、これをオキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体溶出液とする。

２）　オキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体溶出液をすり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）１０ｍｌを加えて溶かす。あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液（みかん以外のかんきつ類の場合は、その１ｍｌ）を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌ（みかん以外のかんきつ類の場合は１０ｍｌ）で展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、これをホルミル体溶出液とする。次いで、ヘキサン及びアセトンの混液（４：１）２５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、これをオキスポコナゾールフマル酸塩溶出液とする。

３）　オキスポコナゾールフマル酸塩溶出液を、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（９：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで、アセトン及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にメタノールを加えて溶かし、２ｍｌとしてオキスポコナゾールフマル酸塩の試験溶液とする。

４）　２）のホルミル体溶出液を、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にメタノールを加えて溶かし、２ｍｌとしてホルミル体の試験溶液とする。

５）　１）のオキサゾリジノン溶出液に蒸留水を加えて４０ｍｌとする。この２０ｍｌを、多孔性ケイソウ土カラムの下にＮＨ_２シリカゲルミニカラムを連結したものに流し入れ、１０分間放置する。酢酸エチル１００ｍｌで展開し、溶出液を２００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとしてオキサゾリジノンの試験溶液とする。

エ　測定機器の操作条件

１）　高速液体クロマトグラフ（オキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体測定用）

　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度　４０℃

　溶離液　メタノール及び蒸留水の混液（１３：７）を用い、オキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体がそれぞれ１０〜２０分で流出するように流速を調整する。

　検出器　波長２２０ｎｍで測定する。

　感度　オキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体のそれぞれ２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　ガスクロマトグラフ（オキサゾリジノン測定用）

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度　オキサゾリジノンの０．０３ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線

１）　オキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体

　オキスポコナゾールフマル酸塩標準品及びホルミル体標準品のそれぞれ０．１〜２ｍｇ／Ｌメタノール溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってオキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体の検量線を作成する。

２）　オキサゾリジノン

　オキサゾリジノン標準品の０．０１５〜０．３ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってオキサゾリジノンの検量線を作成する。

カ　定量試験

　オキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体の試験溶液からそれぞれ２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、オの１）の検量線によりオキスポコナゾールフマル酸塩及びホルミル体の重量を求める。
　オキサゾリジノンの試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの２）の検量線によりオキサゾリジノンの重量を求める。
　このオキスポコナゾールフマル酸塩の重量と、ホルミル体及びオキサゾリジノンの重量の値にそれぞれ係数１．２４及び３．６５を乗じてオキスポコナゾールフマル酸塩の重量に換算したものとを合計し、これに基づき、検体中のオキスポコナゾールフマル酸塩の濃度を算出する。

（３４１）　フルミオキサジン試験法

ア　装置　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

イ　試薬試液

　アセトン　アセトン（特級）

　ヘキサン　ヘキサン（特級）

　メタノール　メタノール（特級）

　ガラス繊維ろ紙　化学分析用ガラス繊維ろ紙

　ケイ酸マグネシウム　カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム

　シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用シリカゲル６９０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム　内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム　内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用アミノプロピル（ＮＨ_２）シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　フルミオキサジン標準品　本品は、フルミオキサジン９９．０％以上を含み、融点は２０１．８〜２０３．８℃である。

ウ　試験溶液の調製

　Ａ法（果実（みかん以外のかんきつ類を除く。）の場合）

１）　検体２０ｇ相当の試料を３００ｍｌの三角フラスコに量り取り、アセトン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて３０分間激しく振とうした後、ガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過する。ろ紙上の残留物についても、三角フラスコに戻してアセトン５０ｍｌを加え、同様の振とう及びろ過の操作を繰り返す。全ろ液を５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。
　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水及びメタノールの混液（１：１）８ｍｌで展開し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。次いで、メタノール１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで、ヘキサン及びアセトンの混液（１７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１０ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ＮＨ_２シリカゲルミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

２）　この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

　Ｂ法（みかん以外のかんきつ類の場合）

　Ａ法の１）と同様の操作を行う。この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１０ｍｌを加えて溶かす。あらかじめ、１３０℃で４時間加熱して活性化したケイ酸マグネシウム１０ｇをヘキサン及びアセトンの混液（９：１）でクロマト管（内径１ｃｍ、長さ３０ｃｍのガラス管）に充てんし、その上に無水硫酸ナトリウム２ｇをヘキサン及びアセトンの混液（９：１）で充てんしておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（９：１）２０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで、ヘキサン及びアセトンの混液（７：３）４０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物についてＡ法の２）と同様の操作を行う。

エ　ガスクロマトグラフの操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度 フルミオキサジンの０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

オ　検量線の作成

　フルミオキサジン標準品の０．１〜２ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってフルミオキサジンの検量線を作成する。

カ　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、オの検量線によりフルミオキサジンの重量を求め、これに基づき、検体中のフルミオキサジンの濃度を算出する。