ゴルフ場で使用される農薬による水質汚濁の防止に係る暫定指導指針について

［平成二・五・二四　環水土七七　各都道府県知事宛　環境庁水質保全局長通知］

改正　平三・七・三○環水土一○九　平四・一二・二一環水土一八七　平九・四・二四環水土一○○　平一三・一二・二八環水土二三四

（別紙）

ゴルフ場で使用される農薬による水質汚濁の防止に係る暫定指導指針

農薬名	指針値（ｍｇ／Ｌ）
（殺虫剤）
アセフェート	０．８
イソキサチオン	０．０８
イソフェンホス	０．０１
エトフェンプロックス	０．８
クロルピリホス	０．０４
ダイアジノン	０．０５
チオジカルブ	０．８
トリクロルホン（ＤＥＰ）	０．３
ピリダフェンチオン	０．０２
フェニトロチオン（ＭＥＰ）	０．０３
（殺菌剤）
アゾキシストロビン	５
イソプロチオラン	０．４
イプロジオン	３
イミノクタジン酢酸塩	０．０６（イミノクタジンとして）
エトリジアゾール（エクロメゾール）	０．０４
オキシン銅（有機銅）	０．４
キャプタン	３
クロロタロニル（ＴＰＮ）	０．４
クロロネブ	０．５
チウラム（チラム）	０．０６
トルクロホスメチル	０．８
フルトラニル	２
プロピコナゾール	０．５
ペンシクロン	０．４
ホセチル	２３
ポリカーバメート	０．３
メタラキシル	０．５
メプロニル	１
（除草剤）
アシュラム	２
ジチオピル	０．０８
シデュロン	３
シマジン（ＣＡＴ）	０．０３
テルブカルブ（ＭＢＰＭＣ）	０．２
トリクロピル	０．０６
ナプロパミド	０．３
ハロスルフロンメチル	０．３
ピリブチカルブ	０．２
ブタミホス	０．０４
フラザスルフロン	０．３
プロピザミド	０．０８
ベンスリド（ＳＡＰ）	１
ペンディメタリン	０．５
ベンフルラリン（ベスロジン）	０．８
メコプロップ（ＭＣＰＰ）	０．０５
メチルダイムロン	０．３

〔目次〕

�T　排出水に係る標準分析方法（個別分析法）

１　アセフェート

２　イソキサチオン

３　イソフェンホス

４　エトフェンプロックス

５　クロルピリホス

６　ダイアジノン

７　チオジカルブ

８　トリクロルホン（ＤＥＰ）

９　ピリダフェンチオン

１０　フェニトロチオン（ＭＥＰ）

１１　アゾキシストロビン

１２　イソプロチオラン

１３　イプロジオン

１４　イミノクタジン酢酸塩

１５　エトリジアゾール（エクロメゾール）

１６　オキシン銅（有機銅）

１７　キャプタン

１８　クロロタロニル（ＴＰＮ）

１９　クロロネブ

２０　チウラム（チラム）

２１　トルクロホスメチル

２２　フルトラニル

２３　プロピコナゾール

２４　ペンシクロン

２５　ホセチル

２６　ポリカーバメート

２７　メタラキシル

２８　メプロニル

２９　アシュラム

３０　ジチオピル

３１　シデュロン

３２　シマジン（ＣＡＴ）

３３　テルブカルブ（ＭＢＰＭＣ）

３４　トリクロピル

３５　ナプロパミド

３６　ハロスルフロンメチル

３７　ピリブチカルブ

３８　ブタミホス

３９　フラザスルフロン

４０　プロピザミド

４１　ベンスリド（ＳＡＰ）

４２　ペンディメタリン

４３　ベンフルラリン（ベスロジン）

４４　メコプロップ（ＭＣＰＰ）

４５　メチルダイムロン

１　イソキサチオン、イソフェンホス、イソプロチオラン、イプロジオン、キャプタン、クロルピリホス、クロロタロニル、シマジン、ジチオピル、ダイアジノン、テルブカルブ、トリクロピル（トリクロピルブトキシエチル）、トルクロホスメチル、ナプロパミド、ピリダフェンチオン、フェニトロチオン、ブタミホス、フルトラニル、プロピコナゾール、プロピザミド、ペンシクロン、ベンスリド、ペンディメタリン、メタラキシル、メチルダイムロン及びメプロニルの測定方法

２　アセフェート及びトリクロルホンの測定方法

３　エトリジアゾール、クロロネブ、ピリブチカルブ及びベンフルラリンの測定方法

４　メタミドホスの測定方法

５　アシュラム、アゾキシストロビン、イソキサベン、オキシン銅、シデュロン、チウラム、トリクロピル酸、ハロスルフロンメチル、フラザスルフロン及びメコプロップの測定方法

　１　アセフェート

（１）　装置
　ガスクロマトグラフ質量分析計又は炎光光度型検出器（ＦＰＤ、Ｐフィルター）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、塩化ナトリウム、酢酸エチル：試薬特級又はこれと同等のもの

　多孔性ケイソウ土カラム：内径約２ｃｍのカラムに２０ｍｌ保持量のカラムクロマトグラフィー用顆粒状多孔性ケイソウ土を充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　アセフェート標準品

　メタミドホス標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　濃縮
　試料２５０ｍｌを５００ｍｌのナス型フラスコに量り取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて５０℃以下で２０ｍｌに濃縮する。これに、塩化ナトリウム５ｇを加えて溶かす。

イ　カラムクロマトグラフィー
　これを多孔性ケイソウ土カラムに流し入れ、１５分間放置する。酢酸エチル２００ｍｌで展開し、溶出液を３００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、１ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件
ガスクロマトグラフ部
　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ５〜１５ｍの溶融シリカ製の管の内面にポリエチレングリコール２０Ｍを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の　分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部
１）　質量分析計
　インターフェース部温度：２００〜２７０℃

　イオン源温度：１５０℃以上

　測定質量数：アセフェートの場合は、１３６、９４、１２５、１８３、メタミドホスの場合は、９４、９５、１４１

　感度：アセフェート及びメタミドホスのそれぞれ０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　炎光光度型検出器
　炎光光度型検出器のフィルター：リン用干渉フィルター（波長５２６ｎｍ）を用いる。

　検出器温度：２６０〜３００℃

　ガス流量：水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度：アセフェート及びメタミドホスのそれぞれ０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　アセフェート標準品及びメタミドホス標準品のそれぞれ０．１〜２�r／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってアセフェート及びメタミドホスの検量線を作成する。

（６）定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりアセフェート及びメタミドホスの重量を求める。このアセフェートの重量の値とメタミドホスの重量の値に係数１．３０を乗じてアセフェートの重量に換算したものを和し、これに基づき、試料中のアセフェートの濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　イソキサチオン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（５：９５）混液５０ｍｌを流下させイソキサチオンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、イソキサチオンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：イソキサチオンの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　イソキサチオン標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりイソキサチオンの重量を求め、これに基づき試料中のイソキサチオン濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　イソフェンホス標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム１０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１６０〜２００℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、イソフェンホスのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：イソフェンホスの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　イソフェンホス標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりイソフェンホスの重量を求め、これに基づき試料中のイソフェンホス濃度を算出する。

　４　エトフェンプロックス

（１）　装置　

　ガスクロマトグラフ質量分析計又は紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　ヘキサン、メタノール、塩化ナトリウム、無水硫酸ナトリウム：試薬特級

　エトフェンプロックス標準品

（３）　試験溶液の調製

ア　抽出

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ及びヘキサン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、ヘキサン層を分取する。残った水層についてもヘキサン１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全ヘキサン層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをヘキサン２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン（高速液体クロマトグラフの場合はメタノール）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件

１）　ガスクロマトグラフ質量分析計

　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　インターフェイス部温度：２００〜２７０℃

　イオン源温度：１５０℃以上

　測定質量数：１６３、３７６、１３５

　感度：エトフェンプロックスの０．１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　高速液体クロマトグラフ

　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：４０℃

　溶離液：メタノール及び蒸留水の混液（９：１）を用い、エトフェンプロックスが８〜１２分で流出するように流速を調整する。

　検出器：波長２２５ｎｍで測定する。

　感度：エトフェンプロックスの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

１）　ガスクロマトグラフ質量分析計を用いる場合

　エトフェンプロックス標準品より０．０５〜１ｍｇ／Ｌのヘキサン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフ質量分析計に注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってエトフェンプロックスの検量線を作成する。

２）　高速液体クロマトグラフを用いる場合

　エトフェンプロックス標準品より０．０５〜１ｍｇ／Ｌのメタノール溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってエトフェンプロックスの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液からガスクロマトグラフ質量分析計を用いる場合は２μｌを、高速液体クロマトグラフを用いる場合は２０μｌを取り、ガスクロマトグラフ質量分析計又は高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりエトフェンプロックスの重量を求め、これに基づき、試料中のエトフェンプロックスの濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　クロルピリホス標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム１０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１６０〜２００℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、クロルピリホスのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：クロルピリホスの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　クロルピリホス標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりクロルピリホスの重量を求め、これに基づき試料中のクロルピリホス濃度を算出する。

（１）　装置
　炎光光度型検出器（ＦＰＤ、Ｐフィルター）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ダイアジノン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム１０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１６０〜２００℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、ダイアジノンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：ダイアジノンの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ダイアジノン標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりダイアジノンの重量を求め、これに基づき試料中のダイアジノン濃度を算出する。

　７　チオジカルブ

（１）　装置

　ガスクロマトグラフ質量分析計又はアルカリ熱イオン型検出器、高感度窒素・リン検出器若しくは炎光光度型検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトン、塩化ナトリウム、酢酸エチル、ジエチレングリコール、水酸化ナトリウム、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、硫酸：試薬特級

　メチル　チオアセトヒドロキサマート標準品

（３）　試験溶液の調製

ア　抽出

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム２０ｇ及び１ｍｏｌ／Ｌ硫酸５ｍｌを加えてｐＨ４以下に調整する。この溶液に酢酸エチル１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．１ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

ウ　加水分解、抽出

　この残留物に４ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液２０ｍｌを加えて溶かし、空冷管を付して８５℃で３０分間放置する。放冷後、１ｍｏｌ／Ｌ硫酸１００ｍｌを加え、酢酸エチル１００ｍｌで３００ｍｌの分液漏斗に洗い入れ、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

エ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．１ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件

ガスクロマトグラフ部

　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２００℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部

　１）　質量分析計

　インターフェース部温度：２００〜２７０℃

　イオン源温度：１５０℃以上

　測定質量数：１０５、８８

　感度：メチル　チオアセトヒドロキサマートの０．１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

　２）　アルカリ熱イオン型検出器、高感度窒素・リン検出器又は炎光光度型検出器

　検出器温度：２５０〜３００℃

　ガス流量：水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　炎光光度型検出器のフィルター：イオウ用干渉フィルター（波長３９４ｎｍ）を用いる。

　感度：メチル　チオアセトヒドロキサマートの０．１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　メチル　チオアセトヒドロキサマート標準品より０．０５〜１ｍｇ／Ｌのアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってメチル　チオアセトヒドロキサマートの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりメチル　チオアセトヒドロキサマートの重量を求め、これに係数１．６９を乗じてチオジカルブの重量に換算し、これに基づき、試料中のチオジカルブの濃度を算出する。

（１）　装置
　炎光光度型検出器（ＦＰＤ、Ｐフィルター）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　トリクロルホン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム６０ｇ、酢酸エチル１００ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、酢酸エチル層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、酢酸エチル層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを酢酸エチル層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、３００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチルで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチルを１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００ｃｍのガラス管

　固体相液体：ポリエチレングリコール系

　温度：注入口・検出器２５０℃、カラム１６０〜２００℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、トリクロルホン由来のピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：トリクロルホンの０．４ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　トリクロルホン標準品より０．１〜２．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりトリクロルホンの重量を求め、これに基づき試料中のトリクロルホン濃度を算出する。

（１）　装置
　炎光光度型検出器（ＦＰＤ、Ｐフィルター）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ピリダフェンチオン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム１０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム２００〜２３０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、ピリダフェンチオンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：ピリダフェンチオンの０．４ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ピリダフェンチオン標準品より０．１〜２．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりピリダフェンチオンの重量を求め、これに基づき試料中のピリダフェンチオン濃度を算出する。

（１）　装置
　炎光光度型検出器（ＦＰＤ、Ｐフィルター）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　フェニトロチオン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム１０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、フェニトロチオンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：フェニトロチオンの０．４ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　フェニトロチオン標準品より０．１〜２．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりフェニトロチオンの重量を求め、これに基づき試料中のフェニトロチオン濃度を算出する。

　１１　アゾキシストロビン

（１）　装置

　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル、アセトン、塩化ナトリウム、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウムミニカラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ケイ酸マグネシウム９００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　固相抽出カラム：内径１０ｍｍ、長さ１０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用スチレンジビニルベンゼン共重合体（ポリスチレン系ゲル、粒径５０μｍ）２６５ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　アゾキシストロビン標準品

（３）　試験溶液の調製

Ａ法　溶媒抽出法

ア　抽出

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

ウ　カラムクロマトグラフィー

　この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（９：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（９：１）３０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、４ｍｌとして試験溶液とする。

Ｂ法　固相抽出法

　試料２００ｍｌを、あらかじめアセトン５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。アセトン５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに移し、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法のウと同様の操作を行う。

（４）　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：４０℃

　溶離液：アセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を用い、アゾキシストロビンが１５〜２０分で流出するように流速を調整する。

　検出器：波長２３５ｎｍで測定する。

　感度：アゾキシストロビンの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　アゾキシストロビン標準品より５００ｍｇ／Ｌのアセトニトリル溶液を調製し、この溶液をアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）で希釈して０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってアゾキシストロビンの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりアゾキシストロビンの重量を求め、これに基づき、試料中のアゾキシストロビンの濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　イソプロチオラン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させイソプロチオランを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い２０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜２００ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム２００〜２４０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、イソプロチオランのピークが保持時間２〜４分となるように調整する。

　感度：イソプロチオランの０．０２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　イソプロチオラン標準品より０．０１〜０．２μｇ／ｍｌのヘキサン溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりイソプロチオランの重量を求め、これに基づき試料中のイソプロチオラン濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　イプロジオン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させイプロジオンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、イプロジオンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：イプロジオンの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　イプロジオン標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりイプロジオンの重量を求め、これに基づき試料中のイプロジオン濃度を算出する。

　１４　イミノクタジン酢酸塩

（１）　装置

　ポストカラム反応蛍光検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル、塩化ナトリウム、過塩素酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、乳酸、ニンヒドリン、ブタノール、ヘキサン、メタノール、硫酸、リン酸一カリウム：試薬特級

　トリエチルアミン：純度９９％以上のもの

　ＣＢＡシリカゲルミニカラム：内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ＣＢＡシリカゲル（シリカゲルにカルボキシメチル基を化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　過塩素酸ナトリウム溶液：過塩素酸ナトリウム１４．１ｇ、水酸化ナトリウム４００ｍｇ及び乳酸１．８ｍｌに蒸留水を加えて１Ｌとしたもの

　トリエチルアミン溶液：水酸化ナトリウム４０ｇ及びトリエチルアミン０．７５ｍｌに蒸留水を加えて１Ｌとしたもの

　発蛍光液：ニンヒドリン３ｇに蒸留水１Ｌを加えて溶かしたもの

　リン酸緩衝溶液（ｐＨ６）：リン酸一カリウム２．７１３ｇを蒸留水１Ｌに溶かした溶液４００ｍｌと、０．１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液７ｍｌを混和し、ｐＨを６に調整したもの

　イミノクタジン酢酸塩標準品

（３）　試験溶液の調製

ア　抽出

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、トリエチルアミン０．１５ｍｌ及び水酸化ナトリウム８ｇを加える。この溶液に塩化ナトリウム５ｇ並びにブタノール及びヘキサンの混液（１：１）１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、ブタノール及びヘキサンの混液（１：１）１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を５００ｍｌの分液漏斗に合わせる。

イ　濃縮

　蒸留水３０ｍｌ及び１ｍｏｌ／Ｌ硫酸２ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、水層を分取する。残った有機溶媒層についても、蒸留水２０ｍｌ及び１ｍｏｌ／Ｌ硫酸０．５ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全水層を５００ｍｌのナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２ｍｌに濃縮する。この濃縮液にリン酸緩衝液５ｍｌを加えた後、０．１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を加えてｐＨ６に調整する。

ウ　カラムクロマトグラフィー

　あらかじめ、ＣＢＡシリカゲルミニカラムにメタノール５ｍｌ及び蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、リン酸緩衝液５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いで０．１ｍｏｌ／Ｌ塩酸メタノール溶液１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で有機溶媒を留去する。この残留物に過塩素酸ナトリウム溶液及びアセトニトリルの混液（１７：５）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：５０℃

　溶離液：過塩素酸ナトリウム溶液及びアセトニトリルの混液（１７：５）を用い、イミノクタジン酢酸塩から誘導化される蛍光体が１０〜１５分で流出するように流速を調整する。

　検出器：励起波長３９５ｎｍ、けい光波長５００ｎｍで測定する。

　蛍光反応槽：溶離液に対し、０．５ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液及び発蛍光液を一定量注入する。

　蛍光反応槽温度：６０℃

　感度：イミノクタジン酢酸塩の１ｎｇから誘導される蛍光体の相当量が十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　イミノクタジン酢酸塩標準品より５００ｍｇ／Ｌのアセトニトリル溶液を調製し、この溶液を過塩素酸ナトリウム溶液及びアセトニトリルの混液（１７：５）で希釈して０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってイミノクタジン酢酸塩の検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりイミノクタジン酢酸塩の重量を求め、これに係数０．６６を乗じてイミノクタジンの重量に換算し、これに基づき、試料中のイミノクタジンの濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　エトリジアゾール標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、酢酸エチル層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、酢酸エチル層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを酢酸エチル層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチルで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチルを１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでジエチルエーテル―ヘキサン（５：９５）混液５０ｍｌを流下させエトリジアゾールを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い２０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ２００ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１６０〜１８０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、エトリジアゾールのピークが保持時間２〜４分となるように調整する。

　感度：エトリジアゾールの０．０２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　エトリジアゾール標準品より０．０１〜０．２μｇ／ｍｌのヘキサン溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりエトリジアゾールの重量を求め、これに基づき試料中のエトリジアゾール濃度を算出する。

（１）　装置
　蛍光分光光度検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　酢酸エチル、メタノール、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム、塩酸、水酸化ナトリウム、硫酸銅、硝酸アルミニウム：試薬特級

　オキシン銅標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　濃縮、酢酸エチル洗浄
　試料１Ｌを１．５Ｌのナス型フラスコに取り、減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で約２０ｍｌまで濃縮し、３００ｍｌの分液漏斗に移す。蒸留水８０ｍｌでナス型フラスコを洗い、分液漏斗に合わせる。１Ｍ塩酸２ｍｌ、１％硫酸銅溶液０．５ｍｌ、塩化ナトリウム３０ｇ及び酢酸エチル１００ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、酢酸エチル層を捨てる。

イ　酢酸エチル抽出
　分液漏斗中の水層を１Ｍ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７〜８に調整する。酢酸エチル１００ｍｌを加え振とう機を用い５分間激しく振とうする。暫時放置し、分液後下層の酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い酢酸エチル層を三角フラスコに合わせる。無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを三角フラスコに入れ、軽く振りまぜ約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過する。ろ液は３００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチルで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチルを約１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ、残った酢酸エチルを完全に揮散させる。メタノールを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　高速液体クロマトグラフ操作条件
　カラム：内径３〜５ｍｍ、長さ１５〜２５ｃｍのステンレス管

　カラム充てん剤：多孔性スチレンジビニルベンゼン共重合体（平均粒径１０μｍ）

　移動相：硝酸アルミニウム１０ｇをメタノール１Ｌに溶解した溶液

　流量：１．０ｍｌ／分

　カラム恒温槽温度：４０℃

　測定波長：励起波長３８０ｎｍ、蛍光波長５２０ｎｍ

　感度：オキシン銅の１０ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　オキシン銅標準品より０．５〜１０μｇ／ｍｌのメタノール溶液を数点調製し、それを２０μｌずつ、高速液体クロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりオキシン銅の重量を求め、これに基づき試料中のオキシン銅濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　キャプタン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させキャプタンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い２０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径０．５３ｍｍ、長さ１０〜１５ｍのキャピラリー管

　固体相液体：シリコン系、膜厚１〜１．５μｍ

　温度：注入口２５０℃、検出器２８０℃、カラム８０℃２分→１５℃／分→２３０℃５分

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウムを用い、キャプタンのピークが保持時間１０〜１２分となるように調整する。

　感度：キャプタンの０．０２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　キャプタン標準品より０．０１〜０．２μｇ／ｍｌのヘキサン溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりキャプタンの重量を求め、これに基づき試料中のキャプタン濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　シリカゲル：カラムクロマトグラフィー用シリカゲルを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　クロロタロニル標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　シリカゲル５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでジエチルエーテル―ヘキサン（１：９）混液６０ｍｌを流下させクロロタロニルを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い２０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜２００ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、クロロタロニルのピークが保持時間２〜４分となるように調整する。

　感度：クロロタロニルの０．０２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　クロロタロニル標準品より０．０１〜０．２μｇ／ｍｌのヘキサン溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりクロロタロニルの重量を求め、これに基づき試料中のクロロタロニル濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　クロロネブ標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでジエチルエーテル―ヘキサン（５：９５）混液６０ｍｌを流下させ、クロロネブを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い２０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜２００ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、クロロネブのピークが保持時間２〜４分となるように調整する。

　感度：クロロネブの０．０２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　クロロネブ標準品より０．０１〜０．２μｇ／ｍｌのヘキサン溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりクロロネブの重量を求め、これに基づき試料中のクロロネブ濃度を算出する。

（１）　装置
　紫外分光光度検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトニトリル、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　チウラム標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム１０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトニトリルを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　高速液体クロマトグラフ操作条件
　カラム：内径３〜５ｍｍ、長さ１５〜２５ｃｍのステンレス管

　カラム充てん剤：シリカゲルにオクタデシル基（Ｃ_１８）を化学的に結合したもの

　移動相：水：アセトニトリル（５０：５０）

　流量：１．０ｍｌ／分

　測定波長：２７２ｎｍ

　カラム高温槽温度：４０℃

　感度：チウラムの２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　チウラム標準品より０．１〜２μｇ／ｍｌのアセトニトリル溶液を数点調製し、それを２０μｌずつ、高速液体クロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりチウラムの重量を求め、これに基づき試料中のチウラム濃度を算出する。

（１）　装置
　炎光光度型検出器（ＦＰＤ、Ｐフィルター）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　トルクロホスメチル標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１６０〜２００℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、トルクロホスメチルのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：トルクロホスメチルの０．４ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　トルクロホスメチル標準品より０．１〜２μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりトルクロホスメチルの重量を求め、これに基づき試料中のトルクロホスメチル濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　フルトラニル標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（２：８）混液５０ｍｌを流下させフルトラニルを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、フルトラニルのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：フルトラニルの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　フルトラニル標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりフルトラニルの重量を求め、これに基づき試料中のフルトラニル濃度を算出する。

　２３　プロピコナゾール

（１）　装置

　ガスクロマトグラフ質量分析計、アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器付き　ガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル、アセトン、塩化ナトリウム、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム：試薬特級

　固相抽出カラム：内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性質を有するもの

　ケイ酸マグネシウムミニカラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　プロピコナゾール標準品

（３）　試験溶液の調製

Ａ法　溶媒抽出法

ア　抽出

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ及びヘキサン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、ヘキサン層を分取する。残った水層についても、ヘキサン５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全ヘキサン層を５００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、５００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをヘキサン２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

ウ　カラムクロマトグラフィー

　この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌを加えて溶かす。

　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）１０ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（１７：３）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

Ｂ法　固相抽出法

　試料２００ｍｌを、あらかじめアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。アセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法のウと同様の操作を行う。

（４）　測定機器の操作条件

ガスクロマトグラフ部

　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

検出部

１）　質量分析計

　インターフェイス部温度：２００〜２７０℃

　イオン源温度：１５０℃以上

　測定質量数：２５９、１７３、１９１

　感度：プロピコナゾールの０．１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器

　検出器温度：２８０〜３００℃

　ガス流量：水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度：プロピコナゾールの０．１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　プロピコナゾール標準品より０．０５〜１ｍｇ／Ｌのアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってプロピコナゾールの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりプロピコナゾールの重量を求め、これに基づき、試料中のプロピコナゾールの濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　ベンゼン、ヨウ化メチル、塩化ナトリウム：試薬特級

　ジメチルスルホキシド：水分が０．１％以下のもの

　水素化ナトリウム：ヘキサンで洗浄し、同溶媒中に保存したもの

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ペンシクロン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、ヘキサン５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、ヘキサン層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層にヘキサン５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、ヘキサン層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇをヘキサン層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌのヘキサンで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴でヘキサンを１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトン―ヘキサン（１５：８５）混液を用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させペンシクロンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を約１０ｍｌまで濃縮し、これを２０ｍｌの共栓付き試験管に少量のヘキサンを用い洗い移す。減圧濃縮器を用い約１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に溶媒を揮散させる。

エ　メチル化
　ベンゼン０．５ｍｌを濃縮残留物に加えて溶かし、ジメチルスルホキシド０．５ｍｌ、ヨウ化メチル０．５ｍｌ、水素化ナトリウム約０．２ｇを加え、栓をして時々振り混ぜながら３０℃で３０分間放置する。ヘキサン５ｍｌを加え、約１分間振とう後、蒸留水約１０ｍｌを徐々に滴下し、過剰の水素化ナトリウムを分解する。少量のヘキサンを用い１００ｍｌの分液漏斗に移し、振とう機を用い５分間振とうする。分液後、ヘキサン層を５０ｍｌの三角フラスコにとり、無水硫酸ナトリウム５〜１０ｇを加え、軽く振り混ぜ約１０分間放置後ろ紙を用いてろ過し、１００ｍｌのナス型フラスコに受ける。５〜６ｍｌのヘキサンで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗いろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い完全に揮散させる。ヘキサンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、ペンシクロンメチル化物のピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：ペンシクロン０．２ｎｇから誘導されるペンシクロンメチル化物のピークが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ペンシクロン標準品の５０μｇを（３）エと同様の操作でメチル化を行い、これをヘキサンで希釈して０．０５〜１．０μｇ／ｍｌの溶液を数点調製し、その４μｌをガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりペンシクロンの重量を求め、これに基づき試料中のペンシクロン濃度を算出する。

　２５　ホセチル

（１）　装置

　アルカリ熱イオン型検出器、炎光光度型検出器又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフ及びメチル化装置（別図）を用いる。

（別図）　メチル化装置の一例



（２）　試薬試液

　イソプロピルアルコール、ジエチルエーテル、しゅう酸、水酸化カリウム：試薬特級

　ジエチレングリコールモノエチルエーテル、Ｎ―メチル―Ｎ―ニトロソ―４―トルエンスルホン酸アミド：純度９８％以上のもの

　ジアゾメタン・ジエチルエーテル溶液：本品は、以下の操作により用時調製したものであり、黄色を呈する。

　メチル化装置のジエチルエーテル管（別図の�T）にジエチルエーテル５ｍｌを、ジアゾメタン発生管（別図の�U）にジエチレングリコールモノエチルエーテル４ｍｌ及び１０ｍｏｌ／Ｌ水酸化カリウム溶液２ｍｌを、反応管（別図の�V）にジエチルエーテル５０ｍｌをそれぞれ入れる。Ｎ―メチル―Ｎ―ニトロソ―４―トルエンスルホン酸アミド２ｇをジエチルエーテル５ｍｌに溶かしてジアゾメタン発生管に入れ、窒素ガスを５分間穏やかに通じて反応させた後の反応管の内容液をとったもの。

　ホセチル標準品

（３）　試験溶液の調製

ア　濃縮

　試料１０ｍｌを１００ｍｌのナス型フラスコに量り取り、０．０１ｍｏｌ／Ｌしゅう酸１ｍｌ加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で１ｍｌに濃縮し、この溶液にイソプロピルアルコール５ｍｌを加える。

イ　メチル誘導体化、濃縮

　この溶液にジアゾメタン・ジエチルエーテル溶液を黄色が残るまで加え、栓をして１５分間放置した後、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で５ｍｌに濃縮する。この濃縮液にイソプロピルアルコールを加えて１０ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件

ガスクロマトグラフ部

　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜１５ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％シアノプロピルメチルシリコンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　炎光光度型検出器のフィルター：リン用干渉フィルター（波長５２６ｎｍ）を用いる。

　試料導入部温度：スプリット方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　検出器温度：２８０〜３００℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとするとともに、水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

　感度：ホセチルの０．１ｎｇから誘導される亜リン酸エチルメチルが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　ホセチル標準品より５０ｍｇ／Ｌの水溶液を調製する。１００ｍｌのメスフラスコに１〜２０ｍｌの範囲で各溶液を量り取り、１ｍｏｌ／Ｌしゅう酸５ｍｌを加え、蒸留水を加えて１００ｍｌとしたものを数点調製し、その溶液の１ｍｌをそれぞれ１００ｍｌのナス型フラスコにとり、イソプロピルアルコール５ｍｌを加える。以下、この溶液について（３）のイと同様の操作を行った後、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってホセチルの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりホセチルの重量を求め、これに基づき、試料中のホセチルの濃度を算出する。

　２６　ポリカーバメート

（１）　装置

　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル、アセトン、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、塩酸、ジクロロメタン、Ｌ―システイン塩酸塩、水酸化ナトリウム、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、ヨウ化メチル：試薬特級

　ポリエチレングリコール：平均分子量４００のもの

　硫酸水素テトラブチルアンモニウム：純度９８％以上のもの

　アルミナミニカラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用中性アルミナ１７１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　Ｃ_１８シリカゲルミニカラム：内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ポリカーバメート標準品

（３）　試験溶液の調製

ア　抽出、メチル化

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム１５ｇ及びＬ―システイン塩酸塩１５ｇを加えた後、１２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムを加えてｐＨを９．６〜１０に調整する。６０分間放置後、０．４ｍｏｌ／Ｌ硫酸水素テトラブチルアンモニウム５ｍｌを加えた後、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨを７．５〜７．８に調整し、０．０５ｍｏｌ／Ｌヨウ化メチル含有ジクロロメタン及びヘキサンの混液（３：１）７０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、同混液７０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをジクロロメタン及びヘキサンの混液（３：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、Ｌ―システイン塩酸塩０．１ｇ及び１％ポリエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水５ｍｌを加えて溶かす。

ウ　カラムクロマトグラフィー

　あらかじめ、Ｃ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、蒸留水５ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでアセトニトリル５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌの三角フラスコに取る。
　あらかじめ、アルミナミニカラムにアセトニトリル５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これに三角フラスコ中の溶液を流し入れ、アセトニトリル３０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、Ｌ―システイン塩酸塩０．１ｇ及び１％ポリエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びアセトニトリルの混液（７：３）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：４０℃

　溶離液：蒸留水及びアセトニトリルの混液（７：３）を用い、ポリカーバメートから誘導されるジメチルジチオカルバミン酸メチル（以下「ＤＭＤＣメチル」という）が１０〜１５分で流出するように流速を調整する。

　検出器：波長２７０ｎｍで測定する。

　感度：ポリカーバメートの１ｎｇから誘導されるＤＭＤＣメチルが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　ポリカーバメート標準品より２ｍｇ／Ｌの水懸濁液を調製し、この５ｍｌを３００ｍｌの分液漏斗に取り、蒸留水２００ｍｌ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム１５ｇ及びＬ―システイン塩酸塩１５ｇを加えた後、１２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムを加えてｐＨを９．６〜１０に調整する。６０分間放置した後、０．４ｍｏｌ／Ｌ硫酸水素テトラブチルアンモニウム５ｍｌを加えた後、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨを７．５〜７．８に調整し、０．０５ｍｏｌ／Ｌヨウ化メチル含有ジクロロメタン及びヘキサンの混液（３：１）７０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、同混液７０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをジクロロメタン及びヘキサンの混液（３：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、Ｌ―システイン塩酸塩０．１ｇ及び１％ポリエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。
　この残留物を蒸留水及びアセトニトリルの混液（７：３）に溶解、希釈して、０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってポリカーバメートの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりポリカーバメートの重量を求め、これに基づき、試料中のポリカーバメートの濃度を算出する

（１）　装置
　ガスクロマトグラフ質量分析計又はアルカリ熱イオン型検出器若しくは高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、塩化ナトリウム、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　メタラキシル標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ並びに酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、１ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件
ガスクロマトグラフ部
　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部
１）　質量分析計
インターフェース部温度：２００〜２７０℃

イオン源温度：１５０℃以上

測定質量数：２０６、１３２、１６０、２４９

感度：メタラキシルの０．４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器
検出器温度：２６０〜３００℃

ガス流量：水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

感度：メタラキシルの０．４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　メタラキシル標準品の０．２〜４ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってメタラキシルの検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりメタラキシルの重量を求め、これに基づき、試料中のメタラキシルの濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　シリカゲル：カラムクロマトグラフィー用シリカゲルを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　メプロニル標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　シリカゲル１０ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させメプロニルを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、メプロニルのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：メプロニルの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　メプロニル標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりメプロニルの重量を求め、これに基づき試料中のメプロニル濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフ及びジアゾメタン発生装置（別図）を用いる。

　　　　　別図　メチル化装置の一例


（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、メタノール、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　含水アルミナ：カラムクロマトグラフィー用酸性アルミナ５０ｇに水２ｍｌを加え１時間振とう後、１６時間放置したもの

　ジアゾメタン―アセトン溶液：別図の�Tにジエチルエーテル５０ｍｌを入れ、�Uにカルビトール６ｍｌ及び１０Ｍ水酸化ナトリウム溶液３ｍｌを入れ、�Vにアセトン５０ｍｌを入れる。次に�UにＰ―トルエンスルホニル―Ｎ―メチル―Ｎ―ニトロソアミドの２％ジエチルエーテル溶液１０ｍｌを入れ、�T、�U、�Vを装置に設置した後、窒素ガスを通じて、発生したジアゾメタンを�Vのアセトンに捕集したもの（アセトンが濃黄色になるまで窒素ガスを通じる。）

　アシュラム標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。２Ｍ塩酸を用いｐＨ２〜３とした後、酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間激しく振とうする。暫時放置し、分液後、酢酸エチル層を分取する。残った水層に酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を更に２回行う。全酢酸エチル層を２００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを加え軽く振り混ぜ約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過する。ろ液は２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチルで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。２％ジエチレングリコールアセトン溶液を数滴加えた後、減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で酢酸エチルを約１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。

イ　メチル化
　ジアゾメタン―アセトン溶液２０ｍｌを上記濃縮残渣に加え、密栓をし、ときどき軽く振り混ぜながら室温に１時間放置する。減圧濃縮器を用い、ジアゾメタン―アセトン溶液を約１〜２ｍｌまで濃縮する。残った溶媒は窒素気流をゆるやかにふきつけ、揮散させる。アセトン―ヘキサン（１５：８５）混液を用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　含水アルミナ５ｇを内径１．０ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに、先の定容液の５ｍｌ（試料１００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次にアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液４０ｍｌ、次いでアセトン―ヘキサン（３０：７０）混液５０ｍｌを流下させ、初めの４０ｍｌは捨て、次の５０ｍｌにアシュラムメチル化物を溶出させ、１００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮する。次いで残った溶媒に窒素気流をゆるやかにふきつけ、完全に揮散させる。メタノールを用い１ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径０．５３ｍｍ、長さ１０〜１５ｍのキャピラリー管

　固体相液体：シリコン系、膜厚１〜１．５μｍ

　温度：注入口２５０℃、検出器２８０℃、カラム１８０℃→１０℃／分→２４０℃５分

ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウムを用い、アシュラムメチル化物のピークが保持時間５〜６分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

感度：アシュラムの０．２ｎｇ相当のアシュラムメチル化物のピークが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　アシュラム標準品の１００ｐｐｍメタノール溶液を調製し、その１ｍｌを２００ｍｌのナス型フラスコに取り、窒素気流をゆるやかにふきつけメタノールを揮散させる。ここにジアゾメタン―アセトン溶液２０ｍｌを加え、（３）イと同様の操作を行い、メチル化を行った後、メタノールで１０ｍｌに定容する。これをメタノールで希釈しアシュラムの０．１〜２．０μｇ／ｍｌ溶液を数点調製し、その２μｌずつをガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し、検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりアシュラムの重量を求め、これに基づき試料中のアシュラム濃度を算出する。

（１）　装置
　ガスクロマトグラフ質量分析計又はアルカリ熱イオン型検出器、高感度窒素・リン検出器若しくは電子捕獲型検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、ヘキサン：それぞれ、３００ｍｌをすり合わせ減圧濃縮器を用いて５ｍｌに濃縮し、その５μｌをガスクロマトグラフに注入したとき、ガスクロマトグラム上の当該物質が示すピーク以外のピークの高さが２×１０^−１１ｇのγ―ＢＨＣが示すピークの高さ以下であるもの。ただし、ガスクロマトグラフ質量分析計又はアルカリ熱イオン型検出器若しくは高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる場合には、それぞれ試薬特級を用いてもよい。

　塩化ナトリウム、無水硫酸ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ジエチレングリコール：純度９８％以上のもの

　ジチオピル標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ及びヘキサン５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、ヘキサン層を分取する。残った水層についても、ヘキサン５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全ヘキサン層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをヘキサン２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、１ｍｌ（電子捕獲型検出器付きガスクロマトグラフを用いる場合は１００ｍｌ）として試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件
ガスクロマトグラフ部
　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部
１）　質量分析計
インターフェース部温度：２００〜２７０℃

イオン源温度：１５０℃以上

測定質量数：３５４、２８６、３０６

感度：ジチオピルの０．４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器
検出器温度：２６０〜３００℃

ガス流量：水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

感度：ジチオピルの０．４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

３）　電子捕獲型検出器
検出器温度：２６０〜３００℃

ガス流量：追加ガスとして高純度窒素ガスを用い、流量を至適条件になるように調整する。

感度：ジチオピルの０．００４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ジチオピル標準品の０．２〜４ｍｇ／Ｌアセトン溶液（電子捕獲型検出器付きガスクロマトグラフを用いる場合は０．００２〜０．０４ｍｇ／Ｌアセトン溶液）を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってジチオピルの検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりジチオピルの重量を求め、これに基づき、試料中のジチオピルの濃度を算出する。

　３１　シデュロン

（１）　装置

　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトン、塩化ナトリウム、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、メタノール：試薬特級

　ケイ酸マグネシウムミニカラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用ケイ酸マグネシウム９００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　固相抽出カラム：内径１０ｍｍ、長さ１０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用スチレンジビニルベンゼン共重合体（ポリスチレン系ゲル、粒径５０μｍ）２６５ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　シデュロン標準品

（３）　試験溶液の調製

Ａ法　溶媒抽出法

ア　濃縮

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

ウ　カラムクロマトグラフィー

　この残留物にヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）５ｍｌを加えて溶かす。 　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（１９：１）３ｍｌで展開し、流出液を捨てる。次いでヘキサン及びアセトンの混液（９：１）１５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にメタノール及び蒸留水の混液（３：２）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

Ｂ法　固相抽出法

　試料２００ｍｌを、あらかじめアセトン５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。アセトン５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに移し、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法のウと同様の操作を行う。

（４）　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：４０℃

　溶離液：メタノール及び蒸留水の混液（３：２）を用い、シデュロンが８〜１２分で流出するように流速を調整する。

　検出器：波長２４０ｎｍで測定する。

　感度：シデュロンの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　シデュロン標準品より５００ｍｇ／Ｌメタノール溶液を調製し、この溶液をメタノール及び蒸留水の混液（３：２）で希釈して０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸に２本のピーク面積の合計値、横軸に重量を取ってシデュロンの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりシデュロンの重量を求め、これに基づき、試料中のシデュロンの濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　シマジン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させ、シマジンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、シマジンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：シマジンの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　シマジン標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりシマジンの重量を求め、これに基づき試料中のシマジン濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　テルブカルブ標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（５：９５）混液５０ｍｌを流下させテルブカルブを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、テルブカルブのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：テルブカルブの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　テルブカルブ標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりテルブカルブの重量を求め、これに基づき試料中のテルブカルブ濃度を算出する。

（１）　装置
　ガスクロマトグラフ質量分析計及び紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトニトリル、アセトン、塩酸、酢酸エチル、水酸化カリウム、無水硫酸ナトリウム、リン酸：試薬特級又はこれと同等のもの

　ジエチレングリコール：純度９８％以上のもの

　０．０１Ｍリン酸緩衝液：１Ｍリン酸１０ｍｌに蒸留水約９５０ｍｌを加え、１０Ｍ水酸化カリウム溶液を加えてｐＨを３．３に調整した後蒸留水を加えて１Ｌとしたもの

　トリクロピル酸標準品

　トリクロピルブトキシエチル標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２５０ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、２Ｍ塩酸５ｍｌ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で２５ｍｌに濃縮する。この濃縮液の１０ｍｌを１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）を加えて溶かし、１ｍｌとしてトリクロピル酸の試験溶液とする。２５ｍｌとした濃縮液の１０ｍｌを別の１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物に、ガスクロマトグラフ質量分析計を用いる場合は、アセトンを加えて溶かし、１ｍｌとして、高速液体クロマトグラフを用いる場合は、アセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）を加えて溶かし、１ｍｌとしてトリクロピルブトキシエチルの試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件
１）　高速液体クロマトグラフ
　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：４０℃

　溶離液：トリクロピル酸の場合は、０．０１Ｍリン酸緩衝液及びアセトニトリルの混液（３：２）を用い、トリクロピル酸が８〜１０分で流出するように流速を調整する。トリクロピルブトキシエチルの場合は、アセトニトリル及び０．０１Ｍリン酸緩衝液の混液（４：１）を用い、トリクロピルブトキシエチルが８〜１０分で流出するように流速を調整する。

　検出器：波長２９５ｎｍで測定する。

　感度：トリクロピル酸及びトリクロピルブトキシエチルのそれぞれ２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　ガスクロマトグラフ質量分析計
　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

　インターフェース部温度：２００〜２７０℃

　イオン源温度：１５０℃以上

　測定質量数：８５、１８２、２１０

　感度：トリクロピルブトキシエチルの０．４ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成
�T　トリクロピル酸の検量線の作成
　トリクロピル酸標準品の５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、この溶液を蒸留水及びアセトニトリルの混液（３：２）で希釈して０．１〜２ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってトリクロピル酸の検量線を作成する。

�U　トリクロピルブトキシエチルの検量線の作成
１）　ガスクロマトグラフ質量分析計を用いる場合
　トリクロピルブトキシエチル標準品の０．２〜４ｍｇ／Ｌアセトン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフ質量分析計に注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってトリクロピルブトキシエチルの検量線を作成する。

２）　高速液体クロマトグラフを用いる場合
　トリクロピルブトキシエチル標準品の５００ｍｇ／Ｌアセトニトリル溶液を調製し、この溶液をアセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）で希釈して０．１〜２ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってトリクロピルブトキシエチルの検量線を作成する。

（６）　定量試験
　トリクロピル酸の試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりトリクロピル酸の重量を求め、これに基づき、試料中のトリクロピル酸の濃度を算出する。

　また、トリクロピルブトキシエチルの試験溶液から、ガスクロマトグラフ質量分析計を用いる場合は２μｌを、高速液体クロマトグラフを用いる場合は２０μｌを取り、ガスクロマトグラフ質量分析計又は高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりトリクロピルブトキシエチルの重量を求め、これに基づき、試料中のトリクロピルブトキシエチルの濃度を算出する。

　このトリクロピル酸の濃度の値とトリクロピルブトキシエチルの濃度の値に係数０．７２を乗じてトリクロピルの濃度に換算したものを和し、試料中のトリクロピルの濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ナプロパミド標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させナプロパミドを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム２００〜２３０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、ナプロパミドのピークが保持時間３〜５分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：ナプロパミドの０．４ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ナプロパミド標準品より０．１〜２．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりナプロパミドの重量を求め、これに基づき試料中のナプロパミド濃度を算出する。

　３６　ハロスルフロンメチル

（１）　装置

　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル、塩化ナトリウム、塩酸、ぎ酸、酢酸エチル、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム、リン酸：試薬特級

　固相抽出カラム：内径１５ｍｍ、長さ６５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）１０００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ＮＨ_２シリカゲルミニカラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用アミノプロピル（ＮＨ_２）シリカゲル（シリカゲルにアミノプロピル基を化学的に結合させたもの）３６０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ハロスルフロンメチル標準品

　メチル　３―クロロ―５―（４，６―ジメトキシピリミジン―２―イルアミノ）―１―メチルピラゾール―４―カルボキシラート（以下「ハロスルフロンメチル転位体」という。）標準品

（３）　試験溶液の調製

Ａ法　溶媒抽出法

ア　抽出

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、６ｍｏｌ／Ｌ塩酸２ｍｌ、塩化ナトリウム１０ｇ並びに酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、有機溶媒層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）１００ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全有機溶媒層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

ウ　カラムクロマトグラフィー

　この残留物に酢酸エチル５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、ＮＨ_２シリカゲルミニカラムに酢酸エチル及びぎ酸の混液（１００：１）５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、酢酸エチル及びぎ酸の混液（１００：１）１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）を加えて溶かし、１ｍｌとして試験溶液とする。

Ｂ法　固相抽出法

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの三角フラスコに量り取り、６ｍｏｌ／Ｌ塩酸２ｍｌを加える。これを、あらかじめアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで０．１ｍｏｌ／Ｌ塩酸及びアセトニトリルの混液（７：３）１０ｍｌ並びに蒸留水１０ｍｌを流し入れる。流出液を捨てた後、約１分間吸引を続け水分を除去する。アセトニトリル１０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法のウと同様の操作を行う。

（４）　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：４０℃

　溶離液：アセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（６０：４０：０．１）を用い、ハロスルフロンメチル及びハロスルフロンメチル転位体がそれぞれ１０〜１５分で流出するように流速を調整する。

　検出器：波長２４５ｎｍで測定する。

　感度：ハロスルフロンメチル及びハロスルフロンメチル転位体のそれぞれ１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　ハロスルフロンメチル標準品及びハロスルフロンメチル転位体標準品よりそれぞれ５００ｍｇ／Ｌのアセトニトリル溶液を調製し、この溶液をアセトニトリル及び蒸留水の混液（１：１）で希釈して０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってハロスルフロンメチル及びハロスルフロンメチル転位体の検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりハロスルフロンメチル及びハロスルフロンメチル転位体の重量を求める。このハロスルフロンメチルの重量の値とハロスルフロンメチル転位体の重量の値に係数１．３３を乗じてハロスルフロンメチルの重量に換算したものとを和し、これに基づき、試料中のハロスルフロンメチルの濃度を算出する。

（１）　装置
　ガスクロマトグラフ質量分析計又はアルカリ熱イオン型検出器若しくは高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、塩化ナトリウム、ヘキサン、無水硫酸ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ケイ酸マグネシウムミニカラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム９００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　ピリブチカルブ標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料１００ｍｌを３００ｍｌの分液漏斗に量り取り、塩化ナトリウム１０ｇ及びヘキサン１００ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、ヘキサン層を分取する。残った水層についても、ヘキサン５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全ヘキサン層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコをヘキサン２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサン１０ｍｌを加えて溶かす。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　あらかじめ、ケイ酸マグネシウムミニカラムにヘキサン１０ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、ヘキサン及びアセトンの混液（４：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にヘキサンを加えて溶かし、４ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件
ガスクロマトグラフ部
　分離管：内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス：高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度：スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム：６０℃で２分保ち、６０〜約２６０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部
１）　質量分析計
インターフェース部温度：２００〜２７０℃

イオン源温度：１５０℃以上

測定質量数：１６５、１０８、１８１

感度：ピリブチカルブの０．０５ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）　アルカリ熱イオン型検出器又は高感度窒素・リン検出器
検出器温度：２６０〜３００℃

ガス流量：水素ガス、空気及び追加ガス（高純度窒素ガス又はヘリウムガス）の流量を至適条件になるように調整する。

感度：ピリブチカルブの０．０５ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ピリブチカルブ標準品の０．０２５〜０．５ｍｇ／Ｌヘキサン溶液を数点調製し、それぞれを２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってピリブチカルブの検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりピリブチカルブの重量を求め、これに基づき、試料中のピリブチカルブの濃度を算出する。

（１）　装置
　炎光光度型検出器（ＦＰＤ、Ｐフィルター）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム：試薬特級又はこれと同等のもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ブタミホス標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、酢酸エチル層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、酢酸エチル層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを酢酸エチル層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチルで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチルを１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム２００〜２４０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、ブタミホスのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：ブタミホスの０．４ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ブタミホス標準品より０．１〜２．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりブタミホスの重量を求め、これに基づき試料中のブタミホス濃度を算出する。

　３９　フラザスルフロン

（１）　装置

　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル、アセトン、塩化ナトリウム、塩酸、酢酸エチル、ジエチレングリコール、無水硫酸ナトリウム、リン酸：試薬特級

　アルミナミニカラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用中性アルミナ１７１０ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　固相抽出カラム：内径１０ｍｍ、長さ２５ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用スチレンビニルベンゼン共重合体（ポリスチレン系ゲル、粒径５０μｍ）２６５ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　フラザスルフロン標準品

（３）　試験溶液の調製

Ａ法　溶媒抽出法

ア　抽出

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの分液漏斗に量り取り、６ｍｏｌ／Ｌ塩酸２ｍｌ、塩化ナトリウム１０ｇ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層３００ｍｌの三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮

　無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコールアセトン溶液１ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。

ウ　カラムクロマトグラフィー

　この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）５ｍｌを加えて溶かす。
　あらかじめ、アルミナミニカラムにアセトニトリル５ｍｌを流し入れ、洗浄しておく。これにナス型フラスコ中の溶液を流し入れ、アセトニトリル及び蒸留水の混液（４：１）２０ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに取り、２％ジエチレングリコールアセトン溶液１ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。この残留物にアセトニトリル及び蒸留水の混液（３：２）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

Ｂ法　固相抽出法

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの三角フラスコに量り取り、６ｍｏｌ／Ｌ塩酸２ｍｌを加える。これを、あらかじめアセトニトリル５ｍｌ、次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄した固相抽出カラムに毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、約１分間吸引を続け水分を除去する。アセトニトリル５ｍｌで展開し、溶出液を５０ｍｌのナス型フラスコに移し、２％ジエチレングリコールアセトン溶液１ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で溶媒を留去する。以下、この残留物についてＡ法のウと同様の操作を行う。

（４）　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤：シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管：内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　分離管槽温度：４０℃

　溶離液：アセトニトリル、蒸留水及びリン酸の混液（６０：４０：０．１）を用い、フラザスルフロンが２０〜２５分で流出するように流速を調整する。

　検出器：波長２４０ｎｍで測定する。

　感度：フラザスルフロンの１ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　フラザスルフロン標準品より５００ｍｇ／Ｌのアセトニトリル溶液を調製し、この溶液をアセトニトリル及び蒸留水の混液（３：２）で希釈して０．０５〜１ｍｇ／Ｌ溶液を数点調製し、それぞれを２０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってフラザスルフロンの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりフラザスルフロンの重量を求め、これに基づき、試料中のフラザスルフロンの濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　プロピザミド標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（５：９５）混液７５ｍｌを流下させプロピザミドを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い２０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜２００ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、プロピザミドのピークが保持時間２〜４分となるように調整する。

　感度：プロピザミドの０．０２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　プロピザミド標準品より０．０１〜０．２μｇ／ｍｌのヘキサン溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりプロピザミドの重量を求め、これに基づき試料中のプロピザミド濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ベンスリド標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させベンスリドを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム２００〜２３０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、ベンスリドのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量が至適条件となるように調整する。

　感度：ベンスリドの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ベンスリド標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりベンスリドの重量を求め、これに基づき試料中のベンスリド濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　５％含水ケイ酸マグネシウム：ケイ酸マグネシウム１００ｇを１３０℃で１６時間活性化し、放冷した後、蒸留水５ｍｌを加え、密栓をして１時間振とうしたもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ペンディメタリン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　５％含水ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでジエチルエーテル―ヘキサン（５：９５）混液５０ｍｌを流下させペンディメタリンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い４ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、ペンディメタリンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：ペンディメタリンの０．２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ペンディメタリン標準品より０．０５〜１．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりペンディメタリンの重量を求め、これに基づき試料中のペンディメタリン濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　ベンフルラリン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでジエチルエーテル―ヘキサン（５：９５）混液５０ｍｌを流下させベンフルラリンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い２０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜２００ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、ベンフルラリンのピークが保持時間２〜４分となるように調整する。

　感度：ベンフルラリンの０．０２ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　ベンフルラリン標準品より０．０１〜０．２μｇ／ｍｌのヘキサン溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりベンフルラリンの重量を求め、これに基づき試料中のベンフルラリン濃度を算出する。

（１）　装置
　電子捕獲型検出器（ＥＣＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、ジエチルエーテル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　ピリジン、塩化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、塩酸：試薬特級

　２，２，２―トリクロロエタノール：純度９９％以上のもの

　Ｎ，Ｎ’―ジシクロヘキシルカルボジイミド

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　メコプロップ標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料２００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。１Ｍ塩酸１０ｍｌ、ジエチルエーテル５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、ジエチルエーテル層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。残った水層にジエチルエーテル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、ジエチルエーテル層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを三角フラスコ中のジエチルエーテル層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌのジエチルエーテルで数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴でジエチルエーテルを１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。

ウ　エステル化及び洗浄
　残留物に２％Ｎ，Ｎ’―ジシクロヘキシルカルボジイミドピリジン溶液０．２ｍｌ、２，２，２―トリクロロエタノール０．５ｍｌを加え、密栓をして６０℃の水浴中で１時間加熱し、反応させる。放冷後、反応液をヘキサン５０ｍｌで２００ｍｌの分液漏斗に移し、２％炭酸水素ナトリウム溶液５０ｍｌを加え１分間軽く振とうし、分液後直ちに水層を捨てる。残ったヘキサン層に０．２Ｍ塩酸５０ｍｌを加え振とう機を用い５分間激しく振とうする。分液後水層を捨て、さらに残ったヘキサン層に蒸留水５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行う。ヘキサン層を１００ｍｌの三角フラスコに分取し、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、（３）イと同様の脱水、濃縮を行い、ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

エ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料１００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでジエチルエーテル―ヘキサン（４：９６）混液５０ｍｌを流下させメコプロップトリクロロエチルエステル化物を溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜２００ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム２００〜２３０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとして高純度窒素ガスを用い、メコプロップトリクロロエチルエステル化物のピークが保持時間２〜４分となるように調整する。

　感度：メコプロップの０．０２ｎｇ相当量のメコプロップトリクロロエチルエステル化物のピークが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　メコプロップ標準品の１００μｇを取り、（３）ウのエステル化及び洗浄と同様の操作を行い、ヘキサンで希釈してメコプロップの０．０１〜０．２μｇ／ｍｌ相当の溶液を数点調製し、それを２μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりメコプロップの重量を求め、これに基づき試料中のメコプロップ濃度を算出する。

（１）　装置
　高感度窒素リン検出器（ＮＰＤ）又はアルカリ熱イオン型検出器（ＦＴＤ）付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液
　ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、無水硫酸ナトリウム：残留農薬試験用又はこれと同等のもの

　塩化ナトリウム：試薬特級

　ケイ酸マグネシウム：カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムを１３０℃で１６時間活性化後、放冷したもの

　ガスクロマトグラフィー用担体：ガスクロマトグラフィー用ケイソウ土を６Ｍ塩酸で２時間還流して洗い、次いで蒸留水で洗液が中性になるまで洗った後乾燥し、メチルシラザン処理したものを用いる。

　メチルダイムロン標準品

（３）　試験溶液の調製
ア　抽出
　試料４００ｍｌをメスシリンダーに取り、５００ｍｌの分液漏斗に移す。塩化ナトリウム２０ｇ、酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、振とう機を用い５分間振とうする。暫時放置し、分液後、有機溶媒層を２００ｍｌの三角フラスコに取る。分液漏斗中の水層に酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分液の操作を行い、有機溶媒層を先の三角フラスコに合わせる。

イ　脱水、濃縮
　無水硫酸ナトリウム２０〜３０ｇを有機溶媒層に加え、軽く振り混ぜ、約１０分間放置した後、ろ紙を用いてろ過し、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。１０〜２０ｍｌの酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）で数回三角フラスコ内を洗い、その液でろ紙上の硫酸ナトリウムを洗い、ろ液に合わせる。減圧濃縮器を用い約４０℃の水浴で酢酸エチル及びヘキサンの混液（１：１）を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。ヘキサンを用い１０ｍｌに定容する。

ウ　カラムクロマトグラフィー
　ケイ酸マグネシウム５ｇを内径１．５ｃｍ、長さ３０ｃｍのクロマト管にヘキサンの湿式法で充てんし、無水硫酸ナトリウム約４ｇを積層する。これに先の定容液の５ｍｌ（試料２００ｍｌ相当）を注ぎ、流下させる。次いでアセトン―ヘキサン（１５：８５）混液５０ｍｌを流下させメチルダイムロンを溶出させ、２００ｍｌのナス型フラスコに受ける。減圧濃縮器を用い、約４０℃の水浴で溶媒を１〜２ｍｌまで濃縮し、更に窒素気流をゆるやかにふきつけ完全に揮散させる。アセトンを用い２ｍｌに定容し、試験溶液とする。

（４）　ガスクロマトグラフ操作条件
　カラム：内径２〜３ｍｍ、長さ１００〜１５０ｃｍのガラス管

　固体相液体：５％シリコン系

　温度：注入口・検出器２５０〜３００℃、カラム１８０〜２２０℃

　ガス流量：キャリヤーガスとしてヘリウム又は高純度窒素ガスを用い、メチルダイムロンのピークが保持時間２〜４分となるように調整するとともに水素及び空気の流量を至適条件となるように調整する。

　感度：メチルダイムロンの０．４ｎｇが十分確認できるよう感度を調整する。

（５）　検量線の作成
　メチルダイムロン標準品より０．１〜２．０μｇ／ｍｌのアセトン溶液を数点調製し、それを４μｌずつ、ガスクロマトグラフに注入し、それぞれのピーク高又はピーク面積を測定し検量線を作成する。

（６）　定量試験
　試験溶液から４μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線によりメチルダイムロンの重量を求め、これに基づき試料中のメチルダイムロン濃度を算出する。

�U　排出水に係る標準分析方法（多成分同時分析法）

１　イソキサチオン、イソフェンホス、イソプロチオラン、イプロジオン、キャプタン、クロルピリホス、クロロタロニル、ジチオピル、シマジン、ダイアジノン、テルブカルブ、トリクロピル（トリクロピルブトキシエチル）、トルクロホスメチル、ナプロパミド、ピリダフェンチオン、フェニトロチオン、ブタミホス、フルトラニル、プロピコナゾール、プロピザミド、ペンシクロン、ベンスリド、ペンディメタリン、メタラキシル、メチルダイムロン及びメプロニルの測定方法

（１）　装置　ガスクロマトグラフ質量分析計を用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　塩酸　塩酸（特級）

　ジエチレングリコール　ジエチレングリコール（純度９８％以上のもの）

　水酸化ナトリウム水酸化ナトリウム（特級）

　固相抽出カラム　内径９ｍｍ、長さ６０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用Ｃ_１８シリカゲル（シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたもの）５００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの（以下「Ｃ_１８シリカゲルミニカラム」という。）及び内径１０ｍｍ、長さ２０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用活性炭（粒径７０〜１００μｍ）４００ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの（以下「活性炭カラム」という。）

　イソキサチオン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにイソキサチオン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　イソフェンホス標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにイソフェンホス標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　イソプロチオラン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにイソプロチオラン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　イプロジオン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにイプロジオン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　キャプタン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにキャプタン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　クロルピリホス標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにクロルピリホス標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　クロロタロニル標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにクロロタロニル標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ジチオピル標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにジチオピル標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　シマジン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにシマジン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ダイアジノン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにダイアジノン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　テルブカルブ標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにテルブカルブ標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　トリクロピルエステル体標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにトリクロピルエステル体標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　トルクロホスメチル標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにトルクロホスメチル標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ナプロパミド標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにナプロパミド標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ピリダフェンチオン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにピリダフェンチオン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　フェニトロチオン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにフェニトロチオン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ブタミホス標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにブタミホス標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　フルトラニル標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにフルトラニル標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　プロピコナゾール標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにプロピコナゾール標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　プロピザミド標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにプロピザミド標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ペンシクロン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにペンシクロン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ベンスリド標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにベンスリド標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ペンディメタリン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにペンディメタリン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　メチルダイムロン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにメチルダイムロン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　メプロニル標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにメプロニル標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　メタラキシル標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにメタラキシル標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　混合標準原液（イソキサチオン、イソフェンホス、イソプロチオラン、イプロジオン、　キャプタン、クロルピリホス、クロロタロニル、ジチオピル、シマジン、ダイアジノン、テルブカルブ、トリクロピルエステル体、トルクロホスメチル、ナプロパミド、ピリダフェンチオン、フェニトロチオン、ブタミホス、フルトラニル、プロピコナゾール、プロピザミド、ペンシクロン、ベンスリド、ペンディメタリン、メタラキシル、メチルダイムロン、メプロニルそれぞれ１０ｍｇ／Ｌ）
　全量フラスコ１００ｍｌに各標準原液１ｍｌを取り、アセトンを標線まで加えたもの

（３）　試験溶液の調製

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの三角フラスコに量り取り、０．１ｍｏｌ／Ｌ塩酸又は０．１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を加え、ｐＨを７に調整する。あらかじめＣ_１８シリカゲルミニカラムにアセトニトリル５ｍｌ、アセトン５ｍｌ次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ、活性炭カラムにメタノール５ｍｌ、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸３０ｍｌ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し入れ洗浄しておく。Ｃ_１８シリカゲルミニカラムの下に活性炭カラムを連結し、ｐＨを調整した試料を毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１０分間吸引を続け水分を除去する。次に連結した固相抽出カラムを分離する。アセトン１０ｍｌで試料が入っていた容器の内壁を洗い、その洗液でＣ_１８シリカゲルミニカラムを展開する。次いでアセトニトリル５ｍｌでＣ_１８シリカゲルミニカラムを展開する。全溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で約１ｍｌまで溶媒を留去し、窒素ガス気流下で乾固する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面にメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス　高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分１０℃の昇温を行う。

　インターフェース部温度　２００〜２７０℃

　イオン源温度　１５０℃以上

　測定質量数　以下のとおり。

化合物名	測定質量数
イソキサチオン	１０５、１７７、３１３
イソフェンホス	２１３、１２１、１８５
イソプロチオラン	１１８、１６２、１８９
イプロジオン	３１４、３１６、１８７
キャプタン	７９、１４９、１１７
クロルピリホス	１９７、１９９、３１４
クロロタロニル	２６６、２６４、２６８
ジチオピル	３５４、２８６、３０６
シマジン	２０１、１８６、１７３
ダイアジノン	１３７、１７９、３０４
テルブカルブ	２０５、２２０
トリクロピルブトキシエチル	８５、１８２、２１０
トルクロホスメチル	２６５、２６７、１２５
ナプロパミド	７２、１２８、２７１
ピリダフェンチオン	９７、３４０、１９９
フェニトロチオン	１２５、１０９、２７７
ブタミホス	２８６、２００、２３２
フルトラニル	１７３、１４５、２８１
プロピコナゾール	２５９、１７３、１９１
プロピザミド	１７３、１７５、１４５
ペンシクロン	１２５、１８０、１２７
ベンスリド	７７、１３１、１４１
ペンディメタリン	２５２、１６２、１９１
メタラキシル	２０６、１３２、１６０
メチルダイムロン	１０７、１１９、９１
メプロニル	１１９、９１、２６９

　感度　各分析対象農薬のそれぞれ０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　混合標準原液１〜２０ｍｌを全量フラスコ１００ｍｌに段階的に取り、それぞれアセトンを標線まで加える。この混合標準液を２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取って分析対象農薬の検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線により重量を求め、これに基づき、試料中の各分析対象農薬の濃度を算出する。

　ただし、トリクロピルについては１で求めたトリクロピルブトキシエチルの濃度に係数０．７２を乗じてトリクロピルの濃度に換算したものと、５で求めたトリクロピル酸の濃度の値を和し、試料中のトリクロピルの濃度を算出する。

２　アセフェート及びトリクロルホンの測定方法

（１）　装置　ガスクロマトグラフ質量分析計又は炎光光度型検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　１（２）と同様である。ただし、メタノール　メタノール（特級）を追加し、標準原液を下記のものに置き換える。

　アセフェート標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにアセフェート標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　トリクロルホン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにトリクロルホン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　混合標準原液（アセフェート、トリクロルホンそれぞれ１０ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌに各標準原液１ｍｌを取り、アセトンを標線まで加えたもの

（３）　試験溶液の調製

　１（３）でＣ_１８シリカゲルミニカラムと分離した活性炭カラムをメタノール３０ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で約１ｍｌまで溶媒を留去し、窒素ガス気流下で乾固する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件

ガスクロマトグラフ部

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面にポリエチレングリコール２０Ｍを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス　高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度　スプリットレス注入方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部

１）質量分析計インターフェース部温度　２００〜２７０℃

　イオン源温度　１５０℃以上

　測定質量数　アセフェートの場合は１３６、９４、１８３、トリクロルホンの場合は７９、１０９、１４５

　感度　アセフェート及びトリクロルホンのそれぞれ０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）炎光光度型検出器

　炎光光度型検出器のフィルター　リン用干渉フィルター（波長５２６ｎｍ）を用いる。

　検出器温度　２８０℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、トリクロルホンが５〜８分に流出するように流量を調整するとともに、水素ガス及び空気の流量を至適条件になるように調整する。

（５）　検量線の作成

　混合標準原液１〜２０ｍｌを１００ｍｌのメスフラスコに段階的に取り、それぞれアセトンを標線まで加える。この混合標準液を２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取って分析対象農薬の検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線により重量を求め、これに基づき、試料中のアセフェート及びトリクロルホンの濃度を算出する。

　ただし、アセフェートについては、２で求めたアセフェートの濃度の値と４で求めたメタミドホスの濃度の値に係数１．３０を乗じてアセフェートの濃度に換算したものを和し、試料中のアセフェート濃度を算出する。

３　エトリジアゾール、クロロネブ、ピリブチカルブ及びベンフルラリンの測定方法

（１）　装置　ガスクロマトグラフ質量分析計又はアルカリ熱イオン型検出器、高感度窒素・リン検出器若しくは電子捕獲型検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトン、酢酸エチル　それぞれ、３００ｍｌをすり合わせ減圧濃縮器を用いて５ｍｌに濃縮し、その５μｌをガスクロマトグラフに注入したとき、ガスクロマトグラム上の当該物質が示すピーク以外のピークの高さが２×１０^−１１ｇのγ−ＢＨＣが示すピークの高さ以下であるもの。ただし、ガスクロマトグラフ質量分析計を用いる場合には、それぞれ試薬特級を用いてもよい。

　塩化ナトリウム　塩化ナトリウム（特級）

　塩酸　塩酸（特級）

　ジエチレングリコール　ジエチレングリコール（純度９８％以上のもの）

　エトリジアゾール標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにエトリジアゾール標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　クロロネブ標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにクロロネブ標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ピリブチカルブ標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにピリブチカルブ標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　ベンフルラリン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにベンフルラリン標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　混合標準原液（エトリジアゾール、クロロネブ、ピリブチカルブ、ベンフルラリンそれぞれ１０ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌに各標準原液１ｍｌを取り、アセトンを標線まで加えたもの

（３）　試験溶液の調製

　試料２００ｍｌを５００ｍｌの三角フラスコに量り取り、０．１ｍｏｌ／Ｌ塩酸又は０．１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液を加え、ｐＨを７に調整する。この溶液を５００ｍｌの分液漏斗に移し、塩化ナトリウム１０ｇ及び酢酸エチル５０ｍｌを加え、振とう機を用いて５分間激しく振とうし、暫時放置した後、酢酸エチル層を分取する。残った水層についても、酢酸エチル５０ｍｌを加え、同様の振とう及び分取の操作を繰り返す。全酢酸エチル層を３００ｍｌの三角フラスコに合わせ、無水硫酸ナトリウム２０ｇを加え、時々振り混ぜながら３０分間放置した後、３００ｍｌのナス型フラスコ中にろ過する。使用した三角フラスコを酢酸エチル２０ｍｌで洗い、その洗液でろ紙上の残留物を洗い、その洗液をナス型フラスコに合わせ、２％ジエチレングリコール・アセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で１ｍｌに濃縮し、室温で窒素ガスを通じて溶媒を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌ（電子捕獲型検出器を用いる場合は２０ｍｌ）として試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件

ガスクロマトグラフ部

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス　高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度　スプリットレス方式の場合は２００〜２７０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜約１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部

１）質量分析計

　インターフェース部温度　２００〜２７０℃

　イオン源温度　１５０℃以上

　測定質量数　エトリジアゾールの場合は２１１、１８３、２１３、クロロネブの場合は１９１、１９３、２０６、ピリブチカルブの場合は１６５、１０８、１８１、ベンフルラリンの場合は２９２、２６４、２７６

　感度　それぞれの０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）電子捕獲型検出器

　検出器温度　２８０〜３００℃

　ガス流量　追加ガスとして高純度窒素ガスを用い、流量を至適条件になるように調整する。

　感度　それぞれの０．０２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　混合標準原液１〜２０ｍｌを１００ｍｌのメスフラスコに段階的に取り、それぞれアセトンを標線まで加える。この混合標準液を２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取って各分析対象農薬の検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線により重量を求め、これに基づき、試料中の各分析対象農薬の濃度を算出する。

４　メタミドホスの測定方法

（１）　装置　ガスクロマトグラフ質量分析計又は炎光光度型検出器付きガスクロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトン　アセトン（特級）

　メタミドホス標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにメタミドホス標準品０．１ｇを量り取り、アセトンを標線まで加えたもの

　メタミドホス標準液（１０ｍｇ／Ｌ）　メタミドホス標準原液１ｍｌを全量フラスコ１００ｍｌに取り、アセトンを標線まで加えたもの

（３）　試験溶液の調製

　試料２００ｍｌを５００ｍｌのナス型フラスコに取り、すり合わせ減圧濃縮器を用いて５０℃以下で水を留去する。この残留物にアセトンを加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　測定機器の操作条件

ガスクロマトグラフ部

　分離管　内径０．２〜約０．７ｍｍ、長さ１０〜３０ｍの溶融シリカ製の管の内面に５０％フェニルメチルポリシロキサンを０．１〜１．５μｍの厚さで被覆したもの又はこれと同等の分離性能を有するものを用いる。

　キャリヤーガス　高純度窒素ガス又はヘリウムガスを用い、内径０．２〜約０．７ｍｍの分離管に対して線速度を毎秒２０〜４０ｃｍとする。

　試料導入部温度　スプリットレス注入方式の場合は１５０℃、コールドオンカラム方式の場合は５０〜１００℃

　分離管槽昇温プログラム　５０℃で２分保ち、５０〜約２８０℃の範囲で毎分２〜２０℃の昇温を行う。

検出部

１）質量分析計

　インターフェース部温度　２００〜２７０℃

　イオン源温度　１５０℃以上

　測定質量数　９４、９５、１４１

　感度　メタミドホスの０．２ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

２）炎光光度型検出器

　炎光光度型検出器のフィルター　リン用干渉フィルター（波長５２６ｎｍ）を用いる。

　検出器温度　２８０℃

　ガス流量　キャリヤーガスとして窒素ガスを用い、メタミドホスが５〜８分に流出するように流量を調整するとともに、水素ガス及び空気の流量を至適条件になるように調整する。

（５）　検量線の作成

　標準液１〜２０ｍｌを全量フラスコ１００ｍｌに段階的に取り、それぞれアセトンを標線まで加える。この混合標準液を２μｌずつガスクロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取ってメタミドホスの検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から２μｌを取り、ガスクロマトグラフに注入し、（５）の検量線により重量を求め、これに基づき、試料中のメタミドホスの濃度を算出する。

５　アシュラム、アゾキシストロビン、イソキサベン、オキシン銅、シデュロン、チウラム、トリクロピル酸、ハロスルフロンメチル、フラザスルフロン及びメコプロップの測定方法

（１）　装置　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフを用いる。

（２）　試薬試液

　アセトニトリル　アセトニトリル（特級）

　アセトン　アセトン（特級）

　クロロホルム　クロロホルム（特級）

　ジエチレングリコール　ジエチレングリコール（純度９８％以上のもの）

　水酸化カリウム　水酸化カリウム（特級）

　リン酸　リン酸（特級）

　固相抽出カラム　内径１０ｍｍ、長さ１０ｍｍのカラムにカラムクロマトグラフィー用スチレンジビニルベンゼン共重合体（ポリスチレン系ゲル、粒径５０μｍ）２６５ｍｇを充てんしたもの又はこれと同等の性能を有するもの

　０．０１ｍｇ／Ｌリン酸緩衝液　１ｍｇ／Ｌリン酸１０ｍｌに蒸留水約９５０ｍｌを加えた後、１０ｍｇ／Ｌ水酸化カリウム溶液を加えてｐＨを３．３に調整し、蒸留水を加えて１Ｌとしたもの

　アシュラム標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにアシュラム標準品０．１ｇを量り取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

　アゾキシストロビン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにアゾキシストロビン標準品０．１ｇを量り取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

　オキシン銅標準原液（２００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにオキシン銅標準品０．０２ｇを量り取り、クロロホルムを標線まで加えたもの

　シデュロン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにシデュロン標準品０．１ｇを量り取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

　チウラム標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにチウラム標準品０．１ｇを量り取り、クロロホルムを標線まで加えたもの

　トリクロピル酸標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにトリクロピル酸標準品０．１ｇを量り取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

　ハロスルフロンメチル標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにハロスルフロンメチル標準品０．１ｇを量り取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

　フラザスルフロン標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにフラザスルフロン標準品０．１ｇを量り取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

　メコプロップ標準原液（１０００ｍｇ／Ｌ）　全量フラスコ１００ｍｌにメコプロップ標準品０．１ｇを量り取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

　混合標準原液（アシュラム、アゾキシストロビン、オキシン銅、シデュロン、チウラム、トリクロピル酸、ハロスルフロンメチル、フラザスルフロン及びメコプロップそれぞれ２５ｍｇ／Ｌ）
　全量フラスコ１００ｍｌにオキシン銅標準原液１２．５ｍｌ及びその他の標準原液各２．５ｍｌを取り、アセトニトリルを標線まで加えたもの

（３）　試験溶液の調製

　試料２５０ｍｌを１Ｌの三角フラスコに量り取り、０．１ｍｇ／Ｌ塩酸を加え、ｐＨを３．５に調整する。

　あらかじめ固相抽出カラムにアセトニトリル５ｍｌ次いで蒸留水５ｍｌを流し入れ洗浄しておく。これにｐＨを調整した試料を毎分１０〜２０ｍｌの流速で流し入れ、次いで蒸留水１０ｍｌを流し、流出液を捨てた後、約１０分間吸引を続け水分を除去する。アセトニトリル５ｍｌで展開し、溶出液を１００ｍｌのナス型フラスコに取り、２％ジエチレングリコールアセトン溶液０．５ｍｌを加え、すり合わせ減圧濃縮器を用いて４０℃以下で約１ｍｌまで溶媒を留去し、窒素ガス気流下で乾固する。この残留物に蒸留水及びアセトニトリルの混液（１３：７）を加えて溶かし、２ｍｌとして試験溶液とする。

（４）　高速液体クロマトグラフの操作条件

　充てん剤　シリカゲルにオクタデシルシランを化学的に結合させたものを用いる。

　分離管　内径２〜６ｍｍ、長さ１５〜３０ｃｍのステンレス管を用いる。

　溶離液　０．０１ｍｇ／Ｌリン酸緩衝液及びアセトニトリルの混液（１３：７）を用いる。

　検出器　アシュラムが流出するときは波長２７０ｎｍで測定し、アゾキシストロビンが流出するときは波長２３５ｎｍで測定し、オキシン銅又はフラザスルフロンが流出するときは波長２４０ｎｍで測定し、シデュロンが流出するときは波長２５５ｎｍで測定し、トリクロピル酸、チウラム及びメコプロップが流出するときは波長２３０ｎｍで測定し、ハロスルフロンメチルが流出するときは波長２４５ｎｍで測定する。

　感度　各分析対象農薬のそれぞれ５ｎｇが十分確認できるように感度を調整する。

（５）　検量線の作成

　混合標準原液０．５〜１０ｍｌを全量フラスコ１００ｍｌに段階的に取り、それぞれ蒸留水及びアセトニトリルの混液（１３：７）を標線まで加える。この混合標準液を４０μｌずつ高速液体クロマトグラフに注入し、縦軸にピーク高、横軸に重量を取って各分析対象農薬の検量線を作成する。

（６）　定量試験

　試験溶液から４０μｌを取り、高速液体クロマトグラフに注入し、（５）の検量線により重量を求め、これに基づき、試料中の各分析対象農薬の濃度を算出する。